LncRNA-FUT3as介导组蛋白H4修饰调控断奶仔猪F18大肠杆菌抗性的分子机制研究

发布时间：2024-06-03 22:03

　　仔猪细菌性腹泻是当今集约化规模化养猪生产中最常见的一类肠道炎症性疾病,给生猪养殖业带来了极其严重的经济损失,其中F18大肠杆菌(E.coli F18)是引起断奶仔猪细菌性腹泻的主要病原,地方品种猪对其抗性的调控机制有待系统阐明。前期通过组学测序筛选出1个大肠杆菌F18感染调控的关键候选长链非编码RNA-lncRNA-FUT3as,在此基础上,本研究围绕lncRNA-FUT3as功能与调控机制开展深入分析,首先对lncRNA-FUT3as表达水平与大肠杆菌F18抗性的关系进行了系统的功能验证,其次利用 RNA pull down、RIP-qPCR、ChIP-qPCR 和 Western blot 等试验技术探讨lncRNA-FUT3as对靶基因的分子调控机制,然后利用RNA干扰、过表达以及CRISPR/Cas9敲除等一系列试验系统验证靶基因表达水平与大肠杆菌F18抗性的关系,最后利用转录组测序、Hispulldown-MS、CoIP-MS以及表达验证等方法探讨靶基因互作蛋白及下游调控机制,以期揭示lncRNA对F18大肠杆菌抗性的表观遗传调控机制,进一步明确抗性功能基因,为今后制订仔猪细...

【文章页数】：136 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－２?ＬｕｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ＾在抗性与敏感个体十二指肠组织的荧光定量结果??

猪十二指肠中的ｍＲＮＡ转录水??平极显著高于抗性型（尸＜０．０１），ｌｎｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ？似在苏太敏感型仔猪十二指肠中的转??录水平也极显著高于抗性型（尸＜０．０１）?；?Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ进一步验证表明，敏感型仔猪??ｌｎｃＲＮＡ－ＦＬＴｉｏｓ表达水平明显高于抗性型。?....

图２－３?ＩｎｃＲＮＡ－ｊＰＣ／ＴＪａｓ在抗性与敏感个体十二指肠组织的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ结果??

猪十二指肠中的ｍＲＮＡ转录水??平极显著高于抗性型（尸＜０．０１），ｌｎｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ？似在苏太敏感型仔猪十二指肠中的转??录水平也极显著高于抗性型（尸＜０．０１）?；?Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ进一步验证表明，敏感型仔猪??ｌｎｃＲＮＡ－ＦＬＴｉｏｓ表达水平明显高于抗性型。?....

图２－５大肠杆菌菌体侵染ＩＰＥＣ－Ｊ２细胞后ＩｎｃＲＮＡ－Ｆｔ／Ｏ似的表达水平??

?第２章ＬｎｃＲＮＡ－ｆＵＢａｓ表达水平与仔猪Ｆ１８大肠杆菌抗性的关系分析???２．２．３?ＬＰＳ诱导和菌体侵染ＩＰＥＣ－Ｊ２细胞后ＩｎｃＲＮＡ－Ｆｔ／Ｏ仍表达变化??荧光定量结果显示，相对于空白对照细胞，ＬＰＳ诱导４?ｈ后其表达未发生显著变化，??８ｈ后出现极显著上升（＾＜０．....

图２－７细菌黏附的菌毛蛋白基因定量检测结果??ｉｕｒｅ?２－７ｕａｎｉａｉｖｅ?ｄｅｅｃｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｓ?ｏｆｉｌｉｎ?ｆｒｏｍ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ａｄｈｅｒｅｎｃｅ??

?第２章ＬｎｃＲＮＡ－ＦＣ／ｒｊｇ；表达水平与仔猪Ｆ１８大肠杆菌抗性的关系分析???１－５＂｜?□?ｓ＼ＦＵＴ３ａｓ??□?Ｃｏｎｔｒｏｌ??§?———?＊＊＊?■?Ｂｌａｎｋ??—＾―?－ｒ?，?＊＊＊?—??Ｉ?＾?ｎ??１１?１１??Ｆ１８ａｂ?Ｆ１８ａｃ??图２－７细菌黏....

本文编号：3988456