伪狂犬病病毒UL23基因转录调控机制研究

发布时间：2024-06-14 06:10

　　猪伪狂犬病,是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)导致的急性传染病,主要表现为母猪繁殖障碍和仔猪神经症状。伪狂犬病病毒属于α疱疹病毒亚科水痘病毒属,编码70多种蛋白,按表达的时序性可分为立即早期、早期和晚期蛋白。IE180(Immediate Early Protein 180,ICP4)和EP0(Early Protein 0,ICP0)分别为立即早期和早期的主要调控蛋白,主要调控病毒前期蛋白的合成以及组装,同时对病毒复制是必须的。除了这两个蛋白外,UL48(VP16)、UL54(ICP27)和UL41(VHS)也是病毒在增殖过程中重要的反式作用因子。UL23基因是伪狂犬病病毒重要的毒力基因,其编码的蛋白为病毒自身所需的胸苷激酶(Thymidine Kinase,TK),在病毒的核酸代谢中发挥重要作用。缺失TK基因可使病毒高度致弱,对敏感动物不致死,所以一些商用弱毒活疫苗是TK基因缺失的。UL23基因在α疱疹病毒亚科中相对保守,其在级联转录调控机制方面报道很少。本研究通过对UL23基因的转录特点以及病毒蛋白和细胞转录因子对该基因转录调控影响进行研究,以便深入...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1伪狂犬病病毒在细胞内的复制周期（Pomeranzetal.,2005）

文L54。早期蛋白合成之后，DNA开始复制，复制通DNA的合成表明PRV复制周期晚期的开始和真白进入细胞核，它们围绕由UL26和UL26.5基因种蛋白质组成，它们分别为UL19（VP5）、UL18因产物充当基因组DNA的入口，同时UL32、U的切割和包....

图1.2转录起始复合体结构（PtashneandGann1997）

硕士学位论文第一激素响应元素HRE和核因子元素NFE。相对应的，序列特异性DNA式作用因子，包括特异性蛋白-1（Sp1）、激活蛋白家族（AP-1）、CCAC/EBP）、类固醇受体（GR）和组织特异性转录因子（NF-κB）(DynanahtandTjian,1986....

图2.1UL23基因5’RACE路线图

1．将2.1.4中提取的RNA用DNase处理，消除产物中DNA对后续操作的影响，具体反应体系表2.1：表2.1DNaseI处理体系Table2.1ThedigestionsystemofDNaseI成分体积10×DNaseIBuffe....

图2.2转录起始位点的鉴定以及在基因组中的位置示意图

5．孵育对应二抗，TBST洗涤6遍，每次5分钟；6．加上底物进行显影操作。2.1.11PRV反式激活因子和细胞转录因子的Co-IP互作验证细胞转录因子PTBP-HA和Sp1-HA分别和对应的PRV反式激活因子UL54-Flag、IE180-Flag和EP0....

本文编号：3994259