重组病毒BoHV-1 gG - /tk - /gD + 和BoHV-1 gG - /tk - /gD5 + 的兔体内安全

发布时间：2024-07-03 01:51

　　【目的】牛传染性鼻气管炎由BoHV-1感染引起,我国对该病的防控尚缺乏商品化标记疫苗,本实验室前期成功研制了BoHV-1 gG^-/tk^-基因缺失疫苗,并通过将BoHV-1和Bo HV-插入BoHV-1 gG^-/tk^-的tk位置,构建了重组病毒BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1 gG^-/tk^-/g D5+。本研究的目的在于评价该重组病毒在兔体内5的免疫原性最好的糖蛋白g D的胞外区序列分别的安全性和免疫原性及对BoHV-1保护力和Bo HV-5的交叉保护力,以期开发出更为有效的牛传染性鼻气管炎标记疫苗。【方法】选用30只日本大耳白兔并随机分成6组,鼻腔接种和攻毒。通过临床症状观察、体温测量和鼻腔排毒检测进行安全性评估。接种28 d后分别使用wt BoHV-1和wt Bo HV-5对兔体进行攻击,并通过临床症状观察、体温测量、鼻腔排毒、病理组织学和组织病毒的分离鉴定进行保护力研究。使用间接ELISA...

【文章页数】：14 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 病毒毒株、细胞和实验动物:
        1.1.2 主要试剂和仪器:
    1.2 动物实验方法
        1.2.1 接种和攻毒:
        1.2.2 重组病毒安全性研究:
        1.2.3 抵抗同型病毒wt Bo HV-1的研究:
        1.2.4 抵抗异型病毒wt Bo HV-5的研究:
    1.3 检测方法
        1.3.1 病毒的形态学检测:
        1.3.2 感染兔组织病毒的分离:
        1.3.3 病毒感染兔组织核酸的PCR检测:
        1.3.4 兔肺组织石蜡包埋切片制备方法:
        1.3.5 鼻腔排毒检测:
        1.3.6 中和抗体的检测:
        1.3.7 间接ELISA检测Bo HV抗体:
        1.3.8 外周血单核细胞增殖水平的检测:
    1.4 统计学分析方法
2 结果与分析
    2.1 重组病毒形态观察
    2.2 重组病毒的安全性研究
    2.3 重组毒免疫抵抗野毒感染能力研究
        2.3.1 抵抗同型病毒wt Bo HV-1感染:
        2.3.2 抵抗异型病毒wt Bo HV-5感染的研究:
    2.4 重组病毒的免疫原性研究
        2.4.1 中和抗体检测:
        2.4.2 间接ELISA检测Bo HV-1和Bo HV-5抗体:
        2.4.3 接种后外周血单核细胞增殖水平的检测:
3 讨论
    3.1 双拷贝糖蛋白g D提高了重组病毒的免疫原性
    3.2 双拷贝糖蛋白g D重组病毒对兔体的安全性



本文编号：4000342