亚硒酸钠对延边奶山羊乳腺上皮细胞过氧化氢所致氧化损伤的保护作用

发布时间：2024-07-07 09:55

　　目的：本实验以延边奶山羊的乳腺上皮细胞作为实验材料,确定最合适体外培养延边奶山羊乳腺上皮细胞的最佳条件,并探究延边奶山羊乳腺上皮细胞在受到外源过氧化氢给予的氧化应激刺激后,加入一定量的亚硒酸钠以发挥其对乳腺上皮细胞的保护作用,并确定亚硒酸钠对乳腺上皮细胞的最佳保护浓度。 方法：(1)分别用组织块培养法和Ⅰ型胶原酶/透明质酸酶消化法两种方法建立延边奶山羊乳腺上皮细胞,并对细胞进行纯化,随后对纯化后的延边奶山羊乳腺上皮细胞的骨架蛋白—角蛋白的表达情况进行检测；(2)用体外培养的延边奶山羊乳腺上皮细胞传代后进行实验。过氧化氢用DMEM/F12培养基分别稀释为5、50、100、200、500μM,以DMEM/F12培养基作为空白对照组。过氧化氢处理4h后,用MTT法观察过氧化氢对乳腺上皮细胞活力的影响,用Hoechst33342/PI荧光染色法观察过氧化氢损伤对乳腺上皮细胞的凋亡情况,DCFH-DA检测细胞内ROS含量；(3)将延边奶山羊乳腺上皮细胞分为3组：正常组(对照组1),过氧化氢损伤组(对照组2),亚硒酸钠保护组。MTT方法检测细胞活力,Hoechst33342/PI双染、Giemsa...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
前言
    1.1 活性氧和自由基简介
    1.2 ROS所引起的氧化应激
    1.3 细胞内抗氧化酶
    1.4 细胞培养中的氧化损伤
    1.5 亚硒酸钠的研究进展
    1.6 乳腺组织结构及乳腺上皮细胞的研究进展
    1.7 乳腺生物反应器
    1.8 本实验的目的及意义
实验一 延边奶山羊乳腺上皮细胞培养体系的建立及鉴定
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    4 小结
实验二 过氧化氢诱导延边奶山羊乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    4 小结
实验三 亚硒酸钠对延边奶山羊乳腺上皮细胞过氧化氢所致氧化损伤的保护作用
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    4 小结
结论
参考文献
致谢
硕士期间论文发表情况



本文编号：4003534