杂合抗菌肽CC34的乳糖诱导及发酵工艺研究

发布时间：2024-11-05 07:59

　　为了降低生产成本,简化下游纯化工作,本研究尝试用乳糖替代IPTG对杂合抗菌肽CC34进行诱导表达,并且对乳糖诱导的条件和培养基组成进行优化选择,并将乳糖诱导与发酵罐发酵工艺相结合,进行了扩大培养。本研究的探索结果如下：1.在本研究过程中,基因工程菌pGEX-6P-1/CC34/BL21 (DE3)实现了乳糖替代IPTG诱导表达CC34融合蛋白,并且诱导表达效果与IPTG诱导效果相当。在乳糖诱导优化的过程中发现,0.5mmol/L左右的乳糖就能够导致融合蛋白的大量表达,其用量与IPTG的用量相当,而乳糖的价格低廉,使用乳糖诱导可使生产成本大幅降低。2.为了提高表达量,本研究对乳糖诱导的条件进行了优化,使其表达效率更高,优化后的条件为：(1)转速：18Or/min; (2)诱导温度：33℃；(3)诱导时间：10h。3.本研究在条件优化的基础上,通过单因素试验设计、正交试验设计和均匀设计进行了摇瓶发酵优化筛选培养基组成。得到了以下结论：(1)过高浓度的葡萄糖抑制乳糖表达,单因素筛选的葡萄糖最佳添加量为1g/L,这在均匀设计中再次得到验证；(2)提高了基因工程菌pGEX-6P-1/CC34/BL...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 抗菌肽
    1.2 抗菌肽在畜牧业上的应用研究进展
    1.3 基因工程菌发酵工艺研究进展
    1.4 研究目的与意义
    1.5 技术路线
第二章 杂合抗菌肽CC34基因工程菌的乳糖诱导表达
    摘要
    2.1 引言
    2.2 材料
    2.3 方法
    2.4 结果与分析
    2.5 讨论
    2.6 结论
第三章 杂合抗菌肽CC34基因工程菌乳糖诱导表达条件的优化
    摘要
    3.1 引言
    3.2 材料
    3.3 方法
    3.4 结果与分析
    3.5 讨论
    3.6 结论
第四章 杂合抗菌肽CC34基因工程菌乳糖诱导培养基组成的优化
    摘要
    4.1 引言
    4.2 材料
    4.3 方法
    4.4 结果与分析
    4.5 讨论
    4.6 结论
第五章 杂合抗菌肽CC34基因工程菌的扩大诱导培养及产品纯化
    摘要
    5.1 引言
    5.2 材料
    5.3 方法
    5.4 结果与分析
    5.5 讨论
    5.6 结论
第六章 总体结论与工作展望
    6.1 总体结论
    6.2 创新点
    6.3 工作展望
参考文献
致谢
附录
个人简历



本文编号：4011477