TGEV双抗体夹心ELISA方法建立与胶体金免疫层析试纸条的制备

发布时间：2024-11-18 21:23

　　猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine，TGEV)主要引起猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis，TGE)，TGE是一种急性、高度接触性的肠道传染病，主要引起仔猪呕吐、严重腹泻、脱水，尤其两周龄以内仔猪致死率可达100%。该病传播迅速给养猪业带来极大的损失。目前对于该病的检测方法有多种，但多数适用于实验室诊断，缺少适用于现场的快速准确检测方法，以期在猪感染早期做出快速诊断，采取有效的防控措施来减少TGE爆发带来的损失。 本实验主要用抗TGEV N蛋白单抗(MAb)和抗TGEV N蛋白多抗血清(PcAb)建立一种检测TGEV双抗体夹心ELISA方法。该方法选用N蛋白作为靶蛋白是因N蛋白为病毒核蛋白，具有高度保守性，在病毒中含量高，与其他病毒无交叉性反应，便于该方法准确诊断，但由于N蛋白位于病毒内部，如何从病毒中释放出N蛋白是本实验的关键。经实验研究，研制出一种病毒N蛋白裂解液，其主要成分有SDS、Tris，实验证明将裂解液与病毒混合，4℃静置30min，一抗为抗TGEV N蛋白单...

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图1猪传染性胃肠炎病毒粒子结构模式

1猪传染性胃肠炎病毒粒子结构模式Fig.1-1ModelofTGEV＇SPellet性和理化特性细胞、猪睾丸细胞、唾液腺细胞[8,9]和管、小肠组织块等分离病毒。初分离暂、轻微、不明显和易被忽略。有的未然[11]。近年来，ST、PK15细胞系养细胞的TGEV可在传....

图2试纸条组装模型

图2试纸条组装模型Fig2ModeloftheImmunityColloidGoldStrip体金试纸条各种反应条件的优化及性能评价酸纤维素膜（NCM）的选择illipore公司的AE98、AE99、HF135和HF180型号的NCM，在四种NC....

图3-1纯化抗猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的SDS-PAGE电泳图

20化抗猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的SDS（ku）2.亲和层析法纯化后单克隆抗体；3.辛酸-硫酸体；PAGEanalysisofpurifiedmonoclonalantibodyagainsteightmarker（ku）;2.Purified....

图3-1诱导表达的重组TGEVN蛋白的SDS-PAGE电泳图

图3-1诱导表达的重组TGEVN蛋白的SDS-PAG标准（ku）；2.未经IPTG诱导后重组菌菌体裂解物菌菌体裂解物Fig.3-1SDS-PAGEanalysisofrecombinantTGEVNweightmarker(ku);2.T....

本文编号：4012183