受体蛋白PBP3的可溶性表达、纯化及牛奶中β-内酰胺类抗生素快速检测试剂盒的研制

发布时间：2024-11-18 21:25

　　β-内酰胺类抗生素在治疗人和动物的细菌感染中是使用最广泛的种抗生素，也是治疗奶牛乳腺炎的常用药物，还被用于动物饲料以促生长和集体预防性治疗。因此，牛奶中的抗生素残留最常见种类为β-内酰胺类抗生素。为了控制该类抗生素的滥用，延缓细菌抗药性的形成，保护消费者的健康，对于可食动物组织和牛奶中的β-内酰胺类抗生素的残留检测是非常重要的。除此之外，牛奶中的β-内酰胺类抗生素残留还会严重影响后续加工中奶制品品质，比如奶酪、黄油和酸奶的起酵以及后期风味的形成。因此，各国政府都制定了食品和牛奶中的最大残留限量来控制消费者摄入抗生素的水平，我国235号农业部公告明确规定了牛奶中8种-内酰胺类抗生素的最高残留限量，在4-100ppb；欧盟理事会第2377/90号规定牛奶中16种-内酰胺类抗生素的最大残留限量，在4ppb-125ppb。可见为满足企业和市场的需求，建立种简单快速灵敏又廉价的残留检测方法是非常迫切的。 目前市场上检测牛奶中的β-内酰胺类抗生素残留的快速检测方法主要包括微生物生长抑制法、免疫分析法和受体分析法三类。微生物法需要较长的培养时间，人为因素影响大且存在很难实现标准化定量检测等缺点。...

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图1.1典型的β-内酰胺类抗生素化学结构式

图1.1典型的β-内酰胺类抗生素化学结构式。左侧：青霉素类右侧：头孢噻呋类Fig1.1Chemicalstructuresoftypicalβ-lactamantibiotics.Left:Penicillins;Right:Cephalosporin....

图1.2青霉素与D-Ala-D-Ala结构相似性比照

白达到像抗体般进行定量检测-内酰胺类抗生素残留，我选择PBP3受体的理由以及对PBP3结构与功能的研究进展。球菌中的PBPs由许多β-1,4-糖苷键连接的N-乙酰葡萄糖胺-N-乙酰胞壁酸（GlcAc-MurNAc多聚体之间通过L-Ala-D-Glu-m-DAP/L-Lys-....

图1.4转肽酶和PBP3的功能示意图

中国农业科学院博士学位论文第章文献综述ng/mL，50%抑菌浓度(IC50)为0.1ug/ml(K.Kosowska-Shicketal,2010)。与此同时，最初人们认为PBP3并没有重要功能，作为D,D-羧肽酶是非必需的，也不是主要靶标，研究也较少，因此，在之前....

图1.5PBP3一级结构图解

PBP3一级结构图解。PBP3包含短的信号肽序列(Met1-Leu14),DomainΙ(25-292aa);DomainⅡ(293-羧基末端螺旋(C-ter)结合在膜上。活性位点位于DomainΙ,下方显示三个保守序列模块。1.5Schematicrepres....

本文编号：4012184