H9N2亚型流感病毒NS1位点突变对Ⅰ型干扰素及ISGs转录影响研究

发布时间：2025-01-15 16:48

　　本研究通过定点突变技术,对A/Quail/Hong Kong/G1/1997(H9N2)毒株NS1蛋白114、124、202、212位进行氨基酸置换,并构建出未置换NS1蛋白重组表达质粒p CAGGS-NS1、位点置换重组表达质粒p CAGGS-NS1/P114S、p CAGGS-NS1/M124V、p CAGGS-NS1/T202A、p CAGGS-NS1/S212P。应用反向遗传技术拯救出野生型未置换病毒Re G1-NS1、位点置换病毒Re G1-NS1/P114S、Re G1-NS1/M124V、Re G1-NS1/T202A、Re G1-NS1/S212P。双荧光素酶试验结果显示,与poly(I:C)组相比,NS1蛋白未置换、NS1蛋白P114S、M124V、S212P置换后,对NF-κB、IRF-3、IFN-β启动子的转录活性均有抑制作用,而NS1蛋白T202A置换后对NF-κB、IRF-3、IFN-β启动子的转录活性无显著抑制。与NS1蛋白未置换组相比,NS1蛋白S212P置换后对NF-κB、IRF-3、IFN-β启动子转录活性的抑制作用最为显著,而NS1蛋白T202A置换后...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图15种NS基因编码蛋白的mRNA剪接模式图

A型流感病毒NS1蛋白研究进展A型流感病毒属正黏病毒科、有囊膜、单股负链RNA病毒，基因组由PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS8个RNA节段组成。作为NS基因的表达产物之一，NS1蛋白可以从宿主和病毒两方面影响病毒的致病力及毒力[6～7]....

图2A型流感病毒NS1蛋白功能分区Figure2FunctionalpartitionofNS1proteinofinfluenzaAvirus

5图2A型流感病毒NS1蛋白功能分区Figure2FunctionalpartitionofNS1proteinofinfluenzaAvirus

图3A型流感病毒NS1蛋白对IFN-β信号通路的影响

10图3A型流感病毒NS1蛋白对IFN-β信号通路的影响Figure3EffectsofNS1proteinofinfluenzaAvirusonIFN-βsignalingpathway

图1.1位点置换NS基因电泳结果

第一章H9N2病毒NS1位点置换对NF-κB、IRF-3与IFN-计分析，计算p值。“n.s.”表示无显著差异；“.01；“***”代表p<0.001；“****”代表p<0位点置换结果毒株基因组RNA，经RT-PCR扩增出病毒NS增出相应位点置换的....

本文编号：4027579