呋喃它酮代谢物AMOZ胶体金及荧光猝灭免疫层析检测技术的建立与对比研究

发布时间：2025-01-15 19:18

　　目的：建立、优化并对比呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉–3-氨基-2-恶唑烷酮（3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone, AMOZ）的胶体金与荧光猝灭免疫试层析检测方法。 方法：将实验室现有的CPAMOZ单克隆抗体标记于胶体金颗粒表面后，喷涂于聚酯膜上，将抗原CPAMOZ-BSA作为检测线（Test line），羊抗鼠IgG作为质控线（Control line）分别包被于硝酸纤维膜上，组装试纸条，优化各实验条件。测定试纸条敏感性，特异性、稳定性及检测时间；将荧光颗粒与抗原CPAMOZ-BSA混合液作为检测线，荧光颗粒为质控线分别包被于硝酸纤维素膜上，制备荧光猝灭试纸条，调整优化各实验条件，测定其灵敏度、检测线性范围、特异性、检测时间，并与胶体金试纸条对比。 结果：成功合成出检测抗原CPAMOZ-BSA；制备了平均颗粒直径为20nm胶体金颗粒；成功研制CPAMOZ胶体金与荧光猝灭免疫层析试纸条，其灵敏度分别为10ppb、0.625ppb，荧光猝灭试纸条线性范围是0.3-10ppb；二者检测时间分别为5min、10min，并均与硝基呋喃代谢物A...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1呋喃它酮分子结构

图1呋喃它酮分子结构Fig.1Themolecularstructureoffuraltadone药物可抑制乙酰辅酶A活性，使糖类不能进入抑菌作用。国外于1959年将呋喃它酮应用于临感染如蜂窝织炎、脓肿、伤口感染、中耳炎、支基呋喃类药物被后，在体内迅速代谢，....

图2竞争法免疫层析原理图

了繁琐的加样、洗涤等步骤，反应迅速并结果判断直观，适合现场大批量快速筛选，目前已被广泛应用于临床诊断检测等。纸条主要有4部分组成：样品垫（sampleapplicationpad）、信号垫（signalgenerationpad）和吸收垫（absorptio固定于P....

图3AMOZ衍化反应方程式Fig3.ThechemicalequationofAMOZderivation

Na2HPO4·12H2O20.67gNaH2PO4·2H2O5.2g定溶于1000mL去离子水中，抽滤后使用；洗脱液（pH2.7）称取谷氨酸3.75g，定容于1000mL，用盐酸调节pH至2.7，抽滤后使中和液（1mol/LpH9.0Tri....

图4AMOZ抗原的紫外光谱图

紫外光谱扫描结果见图4。由图4可知，BSA紫外最大吸收峰波长为抗原CPAMOZ-BSA最大吸收峰位于300nm。CPAMOZ-BSA相对大紫外吸收峰发生了红移。表明完全抗原CPAMOZ-BSA偶联成功

本文编号：4027737