YWHAB蛋白与PCV2 ORF5的互作研究及其对病毒复制的影响

发布时间：2025-04-01 06:23

　　猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科(Circoviridae)的圆环病毒属(Circovirus)成员,为单股负链闭合环状DNA病毒,基因组由1767～1768个核苷酸(nt)组成,病毒粒子为二十面体对称结构、无囊膜、直径约为17 nm,是已知的感染哺乳动物的最小病毒。PCV2主要感染猪,造成感染猪的免疫系统损害和抑制,引起猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD),继发或混合其他病原感染,给养猪业造成严重经济损失,是目前危害养猪业最为严重的病原之一。对PCV2致病机理的阐明是更好防控其对养猪业危害的基础,病毒编码产物功能的研究是揭示PCV2致病机理的重要方面。PCV2的基因组中包含多个潜在开放阅读框(Open reading frame,ORF),目前已有6个ORFs的编码产物被鉴定和进行了功能研究。其中,ORF5是本研究团队鉴定的PCV2的一个新的编码产物,研究发现ORF5蛋白具有引起宿主细胞周期阻滞、诱导细胞内质网应激反应和细胞自噬的作用。通过酵母双杂交技术筛选到多个与ORF5可能存在相互...

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【部分图文】：

图4-4流式细胞仪检测PCV2感染YWHAB过表达及干扰细胞株后细胞凋亡水平

PCV2感染YWHAB过表达及干扰细胞株24h后,收取细胞样品,用流式细胞仪检测其凋亡率。结果如图4-5所示,与对照细胞株(9.3%)及PK-15细胞(9.1%)相比,PCV2感染24h后的YWHAB过表达细胞株(4.5%)细胞凋亡率较低(a)。与对照细胞株(7.3%)及PK....

图4-6 PCV2感染YWHAB过表达及干扰细胞株后细胞ROS水平检测

PCV2感染YWHAB过表达及干扰细胞株24h后,收取细胞样品,用流式细胞仪检测细胞内ROS含量。结果如图4-6所示,与PK-15细胞以及对照细胞株相比,YWHAB过表达细胞株极显著降低了PCV2感染诱导的细胞内ROS水平的增加(P<0.001)。YWHAB干扰细胞株极显著增加....

图1-1两个正交视图中14-3-3的结构(HelicesαA-αI显示为圆柱体)(Yaffe 2002)

14-3-3蛋白具有特异性磷酸丝氨酸/磷酸苏氨酸结合活性,14-3-3二聚体可以与多种细胞蛋白相互作用,包括转录因子、生物合成酶、细胞骨架蛋白、信号分子、凋亡因子和肿瘤抑制因子等。14-3-3靶蛋白一般含有3个高亲和性14-3-3结合基序:RSXpSXP(模式1),RXXXpSX....

图2-1 YWHAB基因的PCR扩增

PCR扩增得到带有不同酶切位点的大小约为741bp的YWHAB基因,结果如图2-1。2.3.1.2载体及YWHAB基因的双酶切

本文编号：4039055