木蝴蝶粗提物对金黄色葡萄球菌小鼠肺炎治疗作用的研究

发布时间：2017-05-29 07:04

  本文关键词：木蝴蝶粗提物对金黄色葡萄球菌小鼠肺炎治疗作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：金黄色葡萄球菌(金葡菌)(Staphylococcus aureus,S.aureus)是临床上重要的机会致病菌,为人兽共患革兰氏阳性病原菌,可引起人和动物多种致死性感染。近年来由于抗生素的长期使用以及耐药性的广泛传播和获得使得金葡菌的耐药性日益严重,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和耐万古霉素金黄色葡萄球菌(Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus,VRSA)的出现使得金葡菌的治疗难度日益加大,对社会造成了严重的经济损失和危害。近年来的研究发现金葡菌的致病力与其分泌的多种毒力因子密切相关,其中α-溶血素是由大部分致病性金葡菌分泌的一种成孔毒素,可裂解靶细胞并导致疾病的发生,是金葡菌引起多种疾病发生的重要毒力因子,提示α-溶血素是抗金葡菌感染的重要潜在靶标。本实验以金葡菌α-溶血素为靶标,根据其溶血活性首先建立了α-溶血素的筛选平台,结果发现木蝴蝶粗提物在较低浓度下(4μg/m L-32μg/m L)可直接中和α-溶血素介导的成孔活性,但是木蝴蝶粗提物对α-溶血素的分泌并无影响;另外,木蝴蝶粗提物对金葡菌的抗菌活性较低,其MIC值为512μg/m L-1024μg/m L,而在木蝴蝶粗提物有效浓度范围内(4μg/m L-32μg/m L)其对金葡菌的生长几乎没有任何影响。上述结果表明在无抗菌活性浓度范围内(4μg/m L-32μg/m L)的木蝴蝶粗提物可直接中和α-溶血素的成孔活性,提示木蝴蝶粗提物是一种潜在的抗金葡菌感染的抗毒力候选复合物。为了进一步验证木蝴蝶粗提物对金葡菌致病力的影响,本实验体外建立了金葡菌和人肺癌上皮细胞A549共感染体系,通过Live/Dead实验和LDH实验分析了木蝴蝶粗提物对金葡菌介导A549细胞损伤作用的影响,结果表明在共感染体系内加入木蝴蝶后,A549细胞存活率显著提高,细胞形态明显得到改善,另外A549细胞释放LDH的水平也显著降低,上述研究结果表明木蝴蝶粗提物可显著降低金葡菌介导A549细胞损伤作用,进一步提示木蝴蝶粗提物是一种潜在的抗金葡菌感染的抗毒力候选复合物。最后,本实验建立了金葡菌小鼠肺炎模型,通过死亡率统计、病理分析以及肺脏菌落定植数等实验进一步验证了木蝴蝶粗提物对小鼠金葡菌肺炎的治疗作用,结果表明经木蝴蝶粗提物治疗后显著降低感染小鼠的致死率,改善感染小鼠肺脏的病理损伤以及降低感染小鼠肺脏菌落定植数。综上所述,几乎无抗菌活性的木蝴蝶粗提物在较低浓度范围内即可直接中和α-溶血素的成孔活性;体外降低金葡菌对A549细胞介导的细胞损伤作用;体内抑制金葡菌介导小鼠肺炎的致病作用。这一结果提示木蝴蝶粗提物具有一定潜力可开发为抗金葡菌感染的抗毒力药物,也为金葡菌及其他病原菌感染提供新的抗感染策略和候选复合物。
【关键词】：金黄色葡萄球菌 抗毒力 α-溶血素 木蝴蝶粗提物
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S853.74;R285.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一篇 文献综述11-34
• 第一章 金黄色葡萄球菌研究进展11-21
• 1.1 金葡菌的生化特性11-12
• 1.2 金葡菌流行病学12-14
• 1.3 金葡菌信号通路系统14-17
• 1.4 金葡菌的致病性17-19
• 1.5 金葡菌的耐药性19-21
• 第二章 金葡菌毒力因子研究进展21-28
• 2.1 分泌型毒力因子21-25
• 2.2 细胞壁表面蛋白25-26
• 2.3 金葡菌生物膜26-28
• 第三章 木蝴蝶生物学活性研究进展28-34
• 3.1 木蝴蝶植物学特征28-29
• 3.2 本草考证的研究29
• 3.3 木蝴蝶的化学成分29-32
• 3.4 木蝴蝶药理作用32-34
• 第二篇 研究内容34-62
• 第一章 木蝴蝶粗提物的制备及其对金黄色葡萄球菌α-溶血素作用研究34-48
• 1.1 材料与方法35-41
• 1.2 结果41-45
• 1.3 讨论45-47
• 1.4 小结47-48
• 第二章 木蝴蝶粗提物对金葡菌介导细胞损伤的抑制作用研究48-54
• 2.1 材料与方法48-51
• 2.2 结果51-52
• 2.3 讨论52-53
• 2.4 小结53-54
• 第三章 木蝴蝶粗提物对金黄色葡萄球菌小鼠肺炎治疗作用54-62
• 3.1 材料与方法54-57
• 3.2 结果57-59
• 3.3 讨论59-61
• 3.4 小结61-62
• 结论62-63
• 参考文献63-73
• 导师简介73-74
• 个人简介74-75
• 致谢75

【参考文献】

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本文编号：404366