C型凝集素受体MR和Dectin-2在树突状细胞参与旋毛虫感染免疫中的作用研究
本文关键词：C型凝集素受体MR和Dectin-2在树突状细胞参与旋毛虫感染免疫中的作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：旋毛虫病作为世界性分布的一种人兽共患病,严重危害人体健康,同时对畜牧业也造成极大地经济损失。寄生线虫由于生活史及其虫体结构的复杂,导致其免疫机制尚未弄清,这对线虫病的预防及治疗带来了困扰。寄生虫免疫逃避机制一直以来都是寄生虫学研究的难点。为探究MR和Dectin-2在旋毛虫感染过程中的作用,本研究通过体内和体外实验发现在旋毛虫感染过程中,小鼠体内树突状细胞表面MR和Dectin-2受体的表达量变化,进一步利用受体抑制剂抑制MR和Dectin-2,检测经抑制处理的树突状细胞致敏旋毛虫肌幼虫ES抗原后的成熟情况,验证两种受体在旋毛虫感染过程中的作用,为旋毛虫的相关研究提供支持。具体研究内容及结果如下:(1)旋毛虫感染对DC表面MR和Dectin-2受体表达的影响:84只雌性BABL/c小鼠平均分成两组,实验组每鼠灌服300条旋毛虫肌幼虫,分别于感染后第7、14、21、28、35、42天取每组小鼠6只,分离脾脏和肠系膜淋巴结(MLN),制备单细胞悬液,用流式细胞术检测脾脏和MLN内DC上Dectin-2的表达情况;对照组不感染旋毛虫。流式结果表明,在感染后第7天,脾脏内树突状细胞表面的MR和Dectin-2均出现明显下降(P㩳0.05),此后脾脏内两种受体均无明显变化,肠系膜淋巴结内MR出现下降,Dectin-2出现升高(P㩳0.05);在感染后第14、21、35天,MLN内DC表面MR出现升高(P㩳0.05);感染后第21、28天MLN内DC表面Dectin-2受体出现升高。(2)旋毛虫ES抗原对BMDC表面MR和Dectin-2的表达的影响:制备旋毛虫ES抗原,体外培养BMDC,将ES抗原致敏BMDC后第6、12、24、36、48h流式细胞术检测MR和Dectin-2的表达量。流式结果表明,应用旋毛虫肌幼虫抗原刺激BMDC我们发现在致敏抗原后第6-36h,MR和Dectin-2均出现降低,在48h恢复正常水平。(3)ES抗原作用下MR和DECTIN-2对BMDC成熟影响研究:将培养的树突状细胞分为阴性对照组(DC)、阳性对照组(DC+ES抗原)、MR抑制对照组(DC+MR抑制剂)、双抑制对照组(DC+双抑制剂)、MR抑制实验组(DC+MR抑制剂+ES抗原)和双抑制实验组(DC+双抑制剂+ES抗原)共六组、每组设5个副孔。加入相应抑制剂后再加入ES抗原,作用15分钟后更换DC普通培养基,48h后流式细胞术检测DC表面CD80和CD86表达量。流式结果表明,抑制MR后,负载旋毛虫ES抗原的DC的CD80和CD86有所升高(P㩳0.05),这说明旋毛虫可以利用MR抑制DC的成熟;同时抑制MR和Dectin-2后,负载旋毛虫ES抗原的DC成熟情况与未抑制组相同。本研究表明旋毛虫可以利用ES抗原,通过MR抑制树突状细胞的识别;同时抑制MR和Dectin-2后,负载旋毛虫ES抗原的DC成熟情况与未抑制组相同,这将有助于丰富旋毛虫感染相关基础理论,为旋毛虫免疫逃避机制的研究提供参考。
【关键词】：旋毛虫 树突状细胞 抗原识别 甘露糖受体 Dectin-2
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S855.9
【目录】：
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-10
- 前言10-11
- 第一篇 文献综述11-19
- 第一章 C型凝集素受体在寄生虫感染免疫调节中的作用11-16
- 1.1 C型凝集素受体的结构11
- 1.2 C型凝集素受体的分类11-12
- 1.3 C型凝集素受体在寄生虫感染中的作用12-16
- 第二章 树突状细胞与寄生虫感染16-19
- 2.1 树突状细胞16-17
- 2.2 树突状细胞与寄生虫感染17-18
- 2.3 展望18-19
- 第二篇 研究内容19-54
- 第一章 旋毛虫感染对DC表面MR和DECTIN-2 受体表达的影响19-37
- 1.1 材料与方法19-23
- 1.2 结果23-34
- 1.3 讨论34-36
- 1.4 小结36-37
- 第二章 ES抗原对BMDC表面MR和DECTIN-2 受体表达的影响37-48
- 2.1.材料与方法37-41
- 2.2 结果41-46
- 2.3 讨论46
- 2.4 小结46-48
- 第三章 ES抗原作用下MR和DECTIN-2 对BMDC成熟影响研究48-54
- 3.1 材料和方法48-50
- 3.2 结果50-52
- 3.3 讨论52-53
- 3.4 小结53-54
- 结论54-55
- 参考文献55-61
- 附录61-62
- 作者简介62-64
- 致谢64
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