表皮葡萄球菌8-32-B株aap基因domain B的原核表达

发布时间：2017-06-23 11:01

  本文关键词：表皮葡萄球菌8-32-B株aap基因domain B的原核表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为获得表皮葡萄球菌aap基因domain B片段的原核表达产物,采用PCR方法扩增引起新疆南疆地区奶牛乳房炎的表皮葡萄球菌株aap基因domain B片段,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-32a(+)-aap,将重组质粒转化至宿主菌E.coli BL21中诱导表达。结果表明,克隆得到aap基因domain B片段为2 316bp,Aap蛋白分子质量184.5ku。在宿主菌E.coli BL21中表达的最佳诱导时间为4h,IPTG最佳诱导浓度为0.75mmol/L;纯化时洗杂缓冲液中咪唑浓度为40mmol/L,洗脱缓冲液中咪唑浓度为200mmol/L时可以获得单一Aap蛋白。
【作者单位】： 塔里木大学生命科学学院新疆兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室;
【关键词】： 表皮葡萄球菌 aap 原核表达
【基金】：国家自然科学基金(31260026) 教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-11-1071) 新疆生产建设兵团博士资金专项(2009JC07)
【分类号】：Q78;S852.611
【正文快照】： 表皮葡萄球菌是引起奶牛隐性乳房炎的主要致病菌[1],其致病性与生物膜形成有关[2-4],生物膜主要成分为胞外多糖黏附因子PIA、胞外DNA和胞外蛋白[5],其中PIA由ica基因座调控合成,且调控途径已被人们熟悉[6],但是近年来,PIA阴性菌株越来越多地被检测出来,因此,人们把研究方向逐

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本文编号：474777