绞股蓝对广西三黄鸡胸腺增龄性变化的影响
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【摘要】:本研究通过在饲料中添加0.5%的绞股蓝粉末,采用HE、改良甲苯胺蓝及免疫组织化学等染色方法,在光学显微镜下观察1-150日龄间,绞股蓝对广西三黄鸡胸腺重量和指数、皮髓面积比、胸腺小体的数量和面积、肥大细胞的数量以及Ghrelin阳性细胞的数量和平均光密度的影响,从组织学的角度探讨绞股蓝对胸腺的作用,以期为绞股蓝增强机体免疫力的进一步研究提供一些形态学依据,并推动绞股蓝的开发利用。光学显微镜下的形态学研究发现:广西三黄鸡胸腺外包裹有一层被膜,被膜深入胸腺内部,将其分成多个大小不一的胸腺小叶,胸腺小叶外围的皮质部染色较深,中央的髓质部染色较浅。在髓质部能观察到三种类型的胸腺小体,即单细胞型胸腺小体、典型同心圆状胸腺小体及团块状胸腺小体。经改良甲苯胺蓝染色的肥大细胞,胞质被异染成紫红色,胞核蓝染,细胞大小不一,形状多样,主要分布于髓质部,多围绕血管、胸腺小体或散在于淋巴细胞之间,在小叶间隙、胸腺皮质和血管中也有少量分布。经免疫组化染色后观察到,Ghrelin阳性细胞主要分布于胸腺皮髓交界处及髓质内,多数为巨噬细胞及上皮性网状细胞,有的胸腺小体细胞也呈现出阳性反应,阳性物质定位于胞质中。统计学结果显示:1、随着日龄的增加,胸腺重量逐渐升高,胸腺指数整体来看是先逐渐升高,达到最大值后开始降低,虽然差异不显著(P0.05),但绞股蓝在一定程度上能够提高胸腺重量及胸腺指数。2、皮髓比逐渐降低,且个各日龄间差异显著,在120日龄时,试验组皮髓比显著大于对照组(P0.05)。3、对照组和试验组的胸腺小体数量分别在56日龄和90日龄前逐渐增多,之后呈波浪式下降,在28日龄及120日龄时,试验组胸腺小体数量显著多于对照组(P0.05),90日龄时,试验组胸腺小体数量极显著的大于对照组(P0.01),56日龄时,对照组胸腺小体数量显著多于试验组(P0.05)。对照组和试验组的胸腺小体面积在120日龄前逐渐增大,之后开始下降,但在各日龄时对照组和试验组间差异不显著,说明绞股蓝对胸腺小体的面积没有显著影响。4、不同日龄间的肥大细胞数量差异明显,总体来看,呈逐渐降低的趋势,提示广西三黄鸡胸腺内肥大细胞的减少可能与性激素和T细胞的变化相关。在120日龄时,试验组的肥大细胞数量极显著的大于对照组(P0.01),150日龄时,试验组的肥大细胞数量显著的大于对照组(P0.05),在90日龄时,试验组也是多于对照组的,但差异不显著(P0.05),说明绞股蓝能够增强老龄动物的免疫功能。5、Ghrelin阳性细胞数量的变化趋势大致表现为先逐渐升高,至120日龄达到最大值后,开始下降,提示老龄胸腺的萎缩可能与Ghrelin的减少有关。在90日龄和150日龄时,试验组的阳性细胞个数显著多于对照组(P0.05)。Ghrelin阳性细胞的平均光密度呈波浪状变化,不同日龄间差异明显,在90日龄和150日龄时,试验组阳性细胞的平均光密度显著大于对照组(P0.05),在14日龄时,试验组也是大于对照组,56曰龄时,对照组大于试验组,但差异均不显著(P0.05)。说明绞股蓝能够提高老龄胸腺中的Ghrelin含量,有助于延缓胸腺萎缩。6、从以上研究结果中可以推测出,在饲料中添加0.5%的绞股蓝粉末能够促进胸腺的早期发育,改善老龄胸腺的组织结构和细胞成分,提高胸腺的免疫功能。
【关键词】:绞股蓝 胸腺 增龄性变化 胸腺小体 肥大细胞 Ghrelin
【学位授予单位】:广西大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S831.5
【目录】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-12
- 常用缩写词12-13
- 综述部分13-28
- 第一章 绞股蓝的研究进展13-21
- 1.1 绞股蓝概述13
- 1.2 绞股蓝的化学成分13-16
- 1.2.1 绞股蓝皂苷13-14
- 1.2.2 绞股蓝多糖14-15
- 1.2.3 黄酮类物质15
- 1.2.4 其他成分15-16
- 1.3 绞股蓝的药理学作用16-19
- 1.3.1 抗肿瘤16-17
- 1.3.2 免疫调节作用17
- 1.3.3 降血脂作用17-18
- 1.3.4 对心血管系统和中枢神经系统的影响18
- 1.3.5 抗氧化及抗衰老18-19
- 1.3.6 其他作用19
- 1.4 绞股蓝的毒力研究19
- 1.5 绞股蓝的开发应用19-21
- 第二章 胸腺的研究进展21-28
- 2.1 胸腺的研究概况21-24
- 2.1.1 胸腺的解剖学位置21
- 2.1.2 胸腺增龄性变化的相关研究21-22
- 2.1.3 胸腺小体的研究现状22-24
- 2.2 肥大细胞的研究现状24-25
- 2.3 Ghrelin的研究现状25-28
- 实验部分28-59
- 前言28-29
- 第一章 材料与方法29-34
- 1.1 试验材料29-30
- 1.1.1 试验动物及分组处理29
- 1.1.2 主要试验药品与试剂29
- 1.1.3 主要仪器设备29-30
- 1.1.4 常用试剂的配制(见附录)30
- 1.2 试验方法30-34
- 1.2.1 动物组织样品取材及固定30
- 1.2.2 石蜡切片的制作30
- 1.2.3 HE染色步骤30
- 1.2.4 MTB染色步骤30-31
- 1.2.5 免疫组织化学染色步骤31-32
- 1.2.6 图片采集和数据统计分析32-34
- 第二章 结果与分析34-50
- 2.1 胸腺的解剖学位置及组织学结构34
- 2.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺重量和指数的影响34-36
- 2.2.1 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺重量的影响34-35
- 2.2.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺指数的影响35-36
- 2.3 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺皮髓比的影响36-38
- 2.3.1 广西三黄鸡胸腺皮质和髓质的变化36-37
- 2.3.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺皮髓比的影响37-38
- 2.4 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺小体的影响38-41
- 2.4.1 广西三黄鸡胸腺小体的形态38-39
- 2.4.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺小体数量的影响39-40
- 2.4.3 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺小体面积的影响40-41
- 2.5 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内MC的影响41-45
- 2.5.1 广西三黄鸡胸腺内MC的分布41-44
- 2.5.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内MC数量的影响44-45
- 2.6 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内Ghrelin的影响45-50
- 2.6.1 广西三黄鸡胸腺内Ghrelin阳性细胞的分布45-47
- 2.6.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内Ghrelin阳性细胞数量的影响47-48
- 2.6.3 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内Ghrelin阳性细胞平均光密度(MOD)的影响48-50
- 第三章 讨论50-58
- 3.1 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺重量及指数的影响50-51
- 3.2 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺皮髓比的影响51-53
- 3.3 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺小体的影响53-55
- 3.4 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内肥大细胞的影响55-56
- 3.5 绞股蓝对广西三黄鸡胸腺内Ghrelin的影响56-58
- 第四章 结论58-59
- 参考文献59-69
- 附录69-71
- 致谢71-72
- 硕士在读期间发表的论文及参与的科研项目72
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