禽IL-2单克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2017-06-28 16:11

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【摘要】：为制备禽源IL-2的单克隆抗体,首先构建chIL-2的原核表达载体并进行表达,用HIS-IL-2蛋白免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后,取小鼠脾与骨髓瘤细胞sp2/0融合,应用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤,最终获得3株稳定分泌chIL-2抗体的杂交瘤,分别命名为1C2,2F2和4B5。并对所获得单抗的特性进行了鉴定,结果表明,3株单抗亚型均为IgG1,抗体亲和力解离常数(K_d)分别为4.81×10~(-10)、1.36×10~(-10)、4.15×10~(-9),均为高亲和力抗体,经过Western Blot确定3株单抗分别识别chIL-2的不同区域,且均能特异性识别chIL-2。该单抗的制备为chIL-2的功能研究和应用奠定了基础。
【作者单位】： 中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室;
【关键词】： 禽源IL- 原核表达 单克隆抗体
【基金】：现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41)
【分类号】：S852.4
【正文快照】： IL-2(Interleukin-2)主要是由T细胞产生的具有重要免疫调节作用的细胞因子。1976年Morgan等[1]发现小鼠脾细胞培养上清液中有一种能够促进和维持T细胞在体外长期生长的因子,将其称为T细胞生长因子(T cell growth factor,TCGF),1979年统一命名为IL-2,1983年Taniguchi等[2]从Con

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本文编号：494470