口服三价铬诱导鸡肝脏氧化应激和损伤的研究

发布时间：2017-07-01 13:01

  本文关键词：口服三价铬诱导鸡肝脏氧化应激和损伤的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：在自然界中,铬(Cr)有“-2”到“+6”各种价态,但以“+3”和“+6”为最常见的价态。Cr6+毒性最强,常与氧结合成铬酸盐和重铬酸盐,是一种很强的氧化剂,而在酸性溶液中很容易被还原成三价铬。Cr3+是最稳定的氧化态,生物活性最高,毒性最小,是动物所必需的、生物体内最稳定、最常见的一种元素。但是,Liu等人研究也表明长期添加高剂量的Cr3+(超过2500mg·kg-1无机Cr3+)会突破动物机体Cr3+的贮存能力和调节能力,致使血Cr3+含量急剧上升,干扰其他营养成分如铁、锌、锰、钙等的吸收和利用,从而降低畜禽的生产性能。Sobol和Schiestl也证明Cr3+通过DNA氧化损伤和Cr3+-DNA相互作用导致DNA损伤。为进一步明确三价铬的毒性,本实验选取海兰褐公鸡为实验对象,水饲CrCl3进行攻毒。首先通过急性致死性实验,结合文献确定半数致死量LD50是5g·kg-1。然后按1/2 LD50,1/4 LD50,1/8 LD50和0的剂量每日两次水饲CrCl3,分别分为高中低剂量和对照组,每组18只鸡。每两周采集各组6只鸡肝脏组织样本,分别制得14天,28天和42天组织匀浆,并用比色法测定总抗氧化能力(T-AOC),抗氧化酶(GSH-PX,CAT,T-SOD)活性,谷胱甘肽(GSH),丙二醛(MDA)以及过氧化氢(H2O2)含量,并结合肝脏组织切片光镜观察确定Cr3+引起家禽肝脏氧化应激和损伤的浓度和时间依赖效应。本实验结果显示高剂量组的总抗氧化能力(T-AOC)随时间增加而降低而在第42天时显著低于对照组,而低剂量组在第14天是显著升高(P0.05);抗氧化酶CAT,GSH-PX,T-SOD含量都随时间增加而降低,但是只有高剂量组在第42天显著低于对照组,中低剂量组在第14、28天时显著高于对照组;GSH与抗氧化酶有相同的变化趋势。脂质过氧化物指标MDA,超氧化物指标H2O2则随时间增加而增加,MDA在第42天时显著高于对照组。在第42天的组织切片观察中发现对照组的肝小叶排列整齐规则,中剂量组出现空泡变性,高剂量组则有明显的炎性细胞浸润。通过本试验的研究数据和组织切片观察,我们初步认为低剂量的CrCl3对鸡肝脏有促进或无害作用,但是长时间集聚引起一定的氧化应激,而高剂量的CrCl3对鸡肝脏有毒害作用,并呈剂量-时间效应。
【关键词】：三价铬 鸡 氧化应激 抗氧化酶 肝脏损伤
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 符号说明4-8
• 中文摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-17
• 1.1 铬的物理化学特性11-12
• 1.2 铬在动物体内的吸收、转运与排泄12-13
• 1.2.1 铬在动物体内的吸收12
• 1.2.2 铬在动物体内的转运12
• 1.2.3 铬在动物体内的排泄12-13
• 1.3 铬在动物体研究的添加形式13
• 1.4 铬的生物学意义13-14
• 1.4.1 铬对蛋白质和核酸代谢的影响13
• 1.4.2 铬对脂类代谢的影响13-14
• 1.4.3 铬对糖代谢的影响14
• 1.5 铬对动物体生产性能和胴体品质的影响14
• 1.5.1 铬对动物机体生产性能的影响14
• 1.5.2 铬对动物胴体品质的影响14
• 1.6. 铬的毒性14-16
• 1.6.1 铬中毒的临床症状15
• 1.6.2 铬对机体抗氧化能力的影响15
• 1.6.3 铬对机体肝脏的损伤15-16
• 1.7 铬的检测技术16
• 1.8 铬的防控技术16
• 1.9 本研究的目的和意义16-17
• 2 材料与方法17-28
• 2.1 试验动物17
• 2.2 试验试剂与溶液17-18
• 2.2.1 常用试剂17
• 2.2.2 溶液配制17-18
• 2.3 试验主要仪器18
• 2.4 半数致死量的确定18-19
• 2.4.1 预备试验18
• 2.4.2 急性毒性试验18-19
• 2.5 三氯化铬对鸡肝脏的毒性损伤作用试验19-27
• 2.5.1 动物分组及给药方法19
• 2.5.2 肝组织匀浆的制备19
• 2.5.3 抗氧化酶活力的测定19-23
• 2.5.3.1 总蛋白（TP）测定（带标准：考马斯亮蓝法）19-20
• 2.5.3.2 过氧化氢酶（CAT）活力测定（可见光法）20-21
• 2.5.3.3 总超氧化物歧化酶（T-SOD）的测定（黄嘌呤氧化酶法）21-22
• 2.5.3.4 谷胱甘肽光氧化物酶（GSH-PX）的测定22-23
• 2.5.4 谷胱甘肽（GSH）的测定23-24
• 2.5.5 总抗氧化能力（T-AOC）24-25
• 2.5.6 脂质过氧化物(MDA)的测定（TBA法）25-26
• 2.5.7 过氧化物(H202)的测定（分光光度计法）26-27
• 2.5.8 肝脏组织切片制作观察27
• 2.6 数据分析27-28
• 3 结果28-35
• 3.1 急性致死实验结果28
• 3.2 三氯化铬对鸡肝脏抗氧化酶活性的影响28-31
• 3.2.1 样品蛋白浓度28-29
• 3.2.2 三氯化铬对CAT活性影响29
• 3.2.3 三氯化铬对总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性影响29-30
• 3.2.4 三氯化铬对肝脏组织中谷胱甘肽光氧化物酶（GSH-PX）的影响30-31
• 3.3 三氯化铬对肝组织中谷胱甘肽（GSH）的影响31
• 3.4 三氯化铬对肝脏组织中总抗氧化能力（T-AOC）的影响31-32
• 3.5 三氯化铬对脂质过氧化物(MDA)的影响32-33
• 3.6 三氯化铬对肝脏组织中过氧化物(H_20_2)的影响33
• 3.7 攻毒后肝脏组织病理学变化33-35
• 3.7.1 高剂量三氯化铬对鸡肝脏组织病理学的影响33-34
• 3.7.2 中剂量三氯化铬对鸡肝脏组织病理学的影响34-35
• 4 讨论35-42
• 4.1 三价铬对家禽的急性毒性作用35-36
• 4.2 三价铬诱导家禽肝脏组织氧化应激和损伤36-40
• 4.2.1 三价铬对家禽肝脏组织抗氧化酶的影响36-38
• 4.2.2 三价铬对肝脏GSH含量的影响38-39
• 4.2.3 三价铬对肝脏组织总抗氧化能力的影响39-40
• 4.3 三价铬对肝脏组织脂质过氧化作用的影响40-41
• 4.4 三价铬对鸡肝脏组织病理切片的影响41-42
• 5 结论及创新点42-43
• 参考文献43-47
• 致谢47-49
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录及著作49

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1 许启桂;;饲料中铬的含量及其在猪体内的吸收问题[J];国外畜牧学(猪与禽);1988年02期

2 曾令庆，，刘玉凤，刘月华;黄河冲积土壤对三价铬、六价铬的吸附特性[J];人民黄河;1996年06期

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本文编号：505973