三聚氰胺对犬肾损伤的试验研究

发布时间：2017-07-03 20:26

  本文关键词：三聚氰胺对犬肾损伤的试验研究

  更多相关文章： 犬 三聚氰胺 肾 OPN CLU 氧化损伤

【摘要】：三聚氰胺是一种应用广泛的工业原料,不能被食用,也不是食品添加剂。蓄意添加三聚氰胺到宠物及人类的食品中是非法行为,已经有过一系列宠物及人类三聚氰胺中毒事件的发生。大量研究已经表明三聚氰胺具有低毒性,长期大量摄入会造成泌尿器官的损害。本试验中通过饲喂犬一定时间和剂量的三聚氰胺,在饲喂期间检测血常规、血清生化和超声影像,并在饲喂结束后检测肾组织骨桥蛋白(osteopontin, OPN)和丛生蛋白(clusterin,CLU)的基因表达量、抗氧化酶活性和肾组织结构,以观察三聚氰胺对犬肾的影响。本试验将8只试验犬随机分为两组,对照组3只,试验组5只,所有试验动物处在相同的饲养环境中。在试验前,所有试验动物进行超声影像、血常规及生化检查,以确保试验犬符合试验要求。试验开始后试验组按每天600mg/kg体重的三聚氰胺剂量饲喂犬,连续饲喂75 d,每隔6d采血、采尿一次。血液用于做血常规及生化检测,尿液用于观察尿沉渣。试验后期,所有试验动物进行超声影像学检查。最后通过手术摘取左侧肾,肾组织分别用于病理组织学观察、抗氧化酶活力测定和荧光定量PCR检测。试验结果如下：(1)饲喂三聚氰胺能够改变犬血液理化指标,白细胞总数及中性粒细胞总数轻微上升；在饲喂第62 d时犬的ALT、AST显著性升高(P0.05)；尿素氮和肌酐则在饲喂过程中持续升高；饲喂三聚氰胺后即可引起犬尿液中有大量白色沉淀产生,尿沉渣镜下观察发现尿液当中的三聚氰胺结晶呈多种形态；试验后期超声影像学显示肾出现结石。(2)饲喂75 d后,荧光定量PCR检查,与对照组相比,试验组肾皮质的OPN和CLU的基因表达量升高,但无显著差异(P0.05),但髓质中OPN的基因表达量显著升高(P0.05),CLU的基因表达量极显著升高(P0.01)。(3)肾组织学观察结果显示：三聚氰胺不仅引起犬肾小管的损害,同时也对肾小球造成损害。部分肾小管极度扩张,有些肾小管萎缩；间质纤维组织增生。部分肾小球肿胀,肾小球内可见细胞增多；肾小囊狭窄甚至消失,肾小球毛细血管消失或内有血栓形成；有些肾小球毛细血管扩张,血浆蛋白渗出并浸润于毛细血管袢,许多肾小管内有蛋白管型。(4)饲喂75 d后,试验组肾髓质GSH-Px、SOD与对照组相比显著下降(P0.05),MDA则显著上升(P0.05)。综上可知,按每天600 mg/kg体重连续饲喂犬三聚氰胺75 d后,能使犬形成肾结石和尿沉渣,引起肾组织抗氧化能力下降,肾组织结构破坏,对肾功能造成严重损害。
【关键词】：犬 三聚氰胺 肾 OPN CLU 氧化损伤
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.292
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-10
• 第一部分 综述10-27
• 1. 三聚氰胺的化学特性及应用10
• 2. 三聚氰胺的同系物及应用10-11
• 3. 三聚氰胺中毒及结石事件11
• 4. 三聚氰胺在动物体内的代谢11-12
• 5. 三聚氰胺的毒性研究进展12-13
• 5.1 三聚氰胺的急性毒性12
• 5.2 三聚氰胺的慢性毒性及致癌性12-13
• 6. 三聚氰胺的无明显损害作用水平及人对三聚氰胺的每日耐受摄入量13-14
• 7. 三聚氰胺结石14-17
• 7.1 三聚氰胺结石的主要成分14
• 7.2 结石形成的原因14-15
• 7.3 三聚氰胺结石的治疗及原理15-16
• 7.4 三聚氰胺结石的诊断16
• 7.5 三聚氰胺对机体的损害16-17
• 8. 三聚氰胺与三聚氰酸的联合作用17-20
• 8.1 三聚氰酸的毒性17
• 8.2 三聚氰胺与三聚氰酸的联合作用17-19
• 8.3 三聚氰胺和三聚氰酸联合摄入对肾的损害19-20
• 参考文献20-27
• 第二部分 试验研究27-74
• 试验一 三聚氰胺对犬血液理化指标及泌尿系统的影响27-42
• 1. 材料27
• 1.1 主要仪器27
• 1.2 主要药品与试剂27
• 2. 试验方法27-28
• 2.1 试验动物27
• 2.2 犬三聚氰胺慢性毒性试验模型制备27
• 2.3 样品收集与检测27-28
• 3. 数据处理28
• 4. 结果28-38
• 4.1 饲喂三聚氰胺前后的犬临床表现28-29
• 4.2 饲喂三聚氰胺对犬血常规指标的影响29-31
• 4.3 饲喂三聚氰胺对犬血清生化指标的影响31-33
• 4.4 饲喂三聚氰胺对肾及膀胱超声影像的影响33-36
• 4.5 三聚氰胺标准品晶体36-37
• 4.6 饲喂三聚氰胺对犬尿沉渣的影响37-38
• 5. 讨论38-40
• 参考文献40-42
• 试验二 三聚氰胺对犬肾组织结构的影响42-58
• 1. 材料42-43
• 1.1 试验动物42
• 1.2 主要试剂42
• 1.3 试验仪器42
• 1.4 试剂配制42-43
• 2. 试验方法43-44
• 2.1 样品采集43
• 2.2 组织学检测43-44
• 3. 结果44-54
• 3.1 肾的剖检病变44-45
• 3.2 正常对照组犬肾组织切片HE染色观察45-46
• 3.3 试验组犬肾组织切片HE染色观察46-51
• 3.4 试验组犬肾组织PAS染色的病理组织学变化51-52
• 3.5 肾组织的扫描电镜观察52-54
• 4. 讨论54-55
• 参考文献55-58
• 试验三 三聚氰胺对犬肾组织OPN和CLU的基因mRNA表达的影响58-66
• 1. 材料58
• 1.1 试验动物58
• 1.2 主要仪器58
• 1.3 试剂58
• 2. 试验方法58-61
• 2.1 试验动物与分组58
• 2.2 样品采集58-59
• 2.3 荧光定量PCR方法检测CLU和OPN基因的mRNA相对表达量59-61
• 3. 结果61-63
• 3.1 犬肾组织总RNA提取的检测结果61
• 3.2 OPN和CLU的基因荧光定量PCR检测结果61-63
• 4. 讨论63-64
• 参考文献64-66
• 试验四 三聚氰胺对犬肾组织抗氧化能力的影响66-74
• 1. 材料66
• 1.1 试验动物66
• 1.2 主要仪器66
• 1.3 试剂66
• 2. 试验方法66-69
• 2.1 样品采集与处理66
• 2.2 蛋白浓度测定66-67
• 2.3 肾组织中GSH-Px、SOD和MDA的活力测定67-69
• 3. 数据处理69
• 4. 结果69-71
• 4.1 试验组与对照组相比GSH-Px活力值的变化69-70
• 4.2 犬肾组织SOD活力值的变化70
• 4.3 犬肾组织MDA活性的变化70-71
• 5. 讨论71
• 参考文献71-74
• 全文结论74-75
• 致谢75-76

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 孙美琦;包海泉;孟兰环;李翠枝;郭军;;三聚氰胺对雌性Wistar大鼠的慢性毒性研究[J];畜牧与饲料科学;2012年04期

2 施珊珊;吴小胜;魏帅;魏益民;杨鸣琦;;三聚氰胺对獭兔的急性毒性试验研究[J];西北农业学报;2011年03期

3 吴松;赖海标;刘朝晖;钟亮;梅全喜;顾向明;王书芹;汪芸;高玉桥;;防石合剂对肾草酸钙结石模型大鼠骨桥蛋白表达的影响[J];亚太传统医药;2010年12期

4 王沙燕,石之,张阮章,徐辉,耿小英,赖真;猪苓汤对肾结石大鼠Osteopotin mRNA表达的影响[J];中国优生与遗传杂志;2005年10期

5 ;Induction of Bladder Lesion by Terephthalic Acid and Its Mechanism[J];Biomedical and Environmental Sciences;2005年04期

6 赖真,耿小茵,王耀帮,石之鳞,张阮章,王沙燕;肾结石大鼠Osteopotin mRNA的表达及猪苓汤和泽泻对其表达的影响[J];中国医师杂志;2005年04期

7 姜学军,冯陶,宓培,张志文,郭应禄;Osteopontin及其mRNA在正常大鼠肾脏的表达[J];中华泌尿外科杂志;1998年04期

8 林童俊,刘耕陶;人多形核白细胞呼吸暴发过程中活性氧的产生及检测[J];生理科学进展;1992年01期

  本文关键词：三聚氰胺对犬肾损伤的试验研究

  更多相关文章： 犬 三聚氰胺 肾 OPN CLU 氧化损伤

，

本文编号：515129