猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用

发布时间：2017-07-06 11:21

  本文关键词：猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用

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【摘要】：【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因设计一套特异性引物及生物素标记探针,结合异硫氰酸荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMP-LFD检测方法。【结果】所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均为阴性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法对RNA的最低检测限为50 pg;反应快速,整个扩增反应可在1 h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察。【结论】应用RTLAMP-LFD检测CSFV特异性强、灵敏度高,并且操作安全、简便、快捷,可以满足基层检疫的需要。
【作者单位】： 华南农业大学兽医学院;
【关键词】： 猪瘟病毒 NSB基因 环介导等温扩增技术 横向流动试纸条技术 病毒检测
【基金】：国家自然科学基金(U1405216;31172321和31472200) 广东省高等教育科技创新特殊项目(2012CXZD0013)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 优先出版网址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20151207.1115.002.html猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的猪的一种高度接触性、急性传染病。该病的高发病率和高死亡率给养猪业造成巨大的经济损失,严重危害畜

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2 袁雪梅;陈宁;陈宇;王萍;童超;李得江;万婧;李肖梁;方维焕;;两种荧光定量PCR方法检测猪瘟病毒的比较及应用[J];中国动物传染病学报;2010年03期

3 刘坤;兰邹然;姜平;;猪瘟病毒分子生物学及检测技术研究进展[J];动物医学进展;2012年10期

4 王镇,闵光伟,李明义,藤俊琳,丁明孝;猪瘟病毒的形态结构与形态发生[J];微生物学报;2000年03期

5 罗廷荣;猪瘟病毒生物学特性研究的一些新进展[J];广西农业生物科学;2001年01期

6 胡建和,张彦明,谢庆阁;猪瘟病毒的分子生物学研究进展[J];动物医学进展;2002年04期

7 聂玉春,王镇,周海霞,邓宏魁,丁明孝;猪瘟病毒的形态结构及侵染机理的研究[J];电子显微学报;2002年05期

8 温国元,万超,潘兹书,张楚瑜;应用荧光定量PCR技术快速定量检测猪瘟病毒[J];武汉大学学报(理学版);2004年06期

9 陈龙宾;;猪瘟病毒研究进展[J];猪业科学;2006年03期

10 李丛丛;李秋艳;;猪瘟病毒的研究综述[J];科技信息;2009年27期

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1 陈国开;李婉艳;金纬虎;李春玲;臧莹安;;几种新型消毒剂抗猪瘟病毒兔体试验[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年

2 聂玉春;王镇;周海霞;邓宏魁;丁明孝;;猪瘟病毒的形态结构及侵染机理的研究[A];第十二届全国电子显微学会议论文集[C];2002年

3 李卫;李树春;;应用弗氏佐剂制备猪瘟病毒抗原免疫家兔获取高效价抗体的试验[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年

4 李学伍;张改平;;猪瘟病毒生物学特性的研究[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年

5 颜晓冬;诸葛增玉;翁小刚;张■;鱼文媛;王九峰;;猪瘟病毒对猪外周血单个核细胞产生细胞因子影响的研究[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年

6 李卫;李树春;;应用弗氏佐剂制备猪瘟病毒抗原免疫家兔获取高效价抗体的试验[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集（上）[C];2005年

7 郭焕成;席进;涂长春;;猪瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会（第三届中国兽药大会学术论坛）论文集[C];2010年

8 谢志勤;谢芝勋;廖敏;邓显文;庞耀珊;刘加波;唐小飞;何竞铭;;反转录聚合酶链反应检测猪瘟病毒方法的建立与应用[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年

9 涂长春;;中国猪瘟病毒分子流行病学研究进展[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年

10 郭焕成;席进;涂长春;;猪瘟病毒基因分型寡核苷酸芯片方法的建立[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会论文集[C];2010年

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1 中国兽药监察所 副研究员 王琴;猪瘟病毒E2基因的研究进展及其应用[N];中国畜牧水产报;2000年

2 长安区畜牧兽医站 每小平;谨防猪春季常见病[N];陕西科技报;2004年

3 葛密艳;猪注射疫苗后过敏咋办[N];河北科技报;2007年

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1 李河林;猪瘟病毒重组腺病毒载体疫苗的构建及免疫保护试验[D];西北农林科技大学;2015年

2 童超;猪瘟病毒石门株和疫苗C株嵌合病毒构建及其特性鉴定[D];浙江大学;2015年

3 林鸷;白介素-1β和胆固醇在猪瘟病毒感染中的作用[D];西北农林科技大学;2015年

4 郭焕成;猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒寡核苷酸芯片的研究与应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年

5 戚昀;猪瘟病毒表位疫苗的研究[D];清华大学;2009年

6 冯励;猪瘟病毒感染对宿主细胞免疫应答基因的影响[D];广西大学;2012年

7 王铁东;抗猪瘟病毒转基因猪的构建及初步研究[D];吉林大学;2009年

8 宁蓬勃;猪瘟病毒石门株与C株感染宿主细胞差异表达基因及其在病毒致病中的作用[D];西北农林科技大学;2013年

9 周斌;假型猪瘟病毒体系构建及衣壳蛋白靶向灭活策略抗猪瘟病毒感染研究[D];南京农业大学;2010年

10 李江南;RNA干扰途径抗猪瘟病毒研究[D];吉林大学;2011年

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1 安丽菁;蛋白质二硫键异构酶（PDI）表达与猪瘟病毒感染相关性研究[D];西北农林科技大学;2015年

2 王向鹏;猪瘟病毒野毒胶体金免疫层析检测方法的建立[D];西北农林科技大学;2010年

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4 洪海霞;猪脐静脉血管内皮细胞的分离培养及猪瘟病毒对其的致病变作用[D];西北农林科技大学;2004年

5 张韧;猪瘟病毒荧光抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2013年

6 王海震;猪瘟血清抗体检测试剂盒的研制与抗猪瘟病毒基因工程疫苗的研究[D];南京农业大学;2005年

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8 许保疆;稳定分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用[D];河南农业大学;2009年

9 朱妍;猪瘟病毒特异性单克隆抗体的研究[D];吉林农业大学;2005年

10 吴丹;猪α干扰素基因的克隆、表达及其抗猪瘟病毒活性的研究[D];中国农业大学;2003年

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本文编号：526005