鸡β-防御素2在大肠杆菌中的串联表达及抗菌活性分析

发布时间：2017-07-30 01:18

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【摘要】：利用基因串联技术表达鸡β-防御素2(AvBD2)重组蛋白,分析其生物结构活性以及蛋白表达量变化。构建了重组串联表达载体p ET-28a-AvBD2op-AvBD2,并将其转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达融合蛋白,经镍柱纯化后进行Western-blot检测、Tricine-SDS-PAGE分析和MALDI-TOF-MS质谱分析。结果显示,单表达工程菌和串联表达工程菌均在9500 u处有特异性条带;采用BCA法测得的单、串联表达工程菌纯化后的蛋白质量浓度分别为0.258和0.769 mg/m L;通过凝胶成像系统分析,单表达工程菌中目标蛋白的表达量约占上清总蛋白的10.3%,而串联表达的约占上清总蛋白的18.3%;MALDI-TOF-MS质谱分析结果表明,单、串联表达蛋白产物的分子质量分别为4 300、7 811 u;琼脂孔穴扩散抑菌法检测证明纯化蛋白对多种微生物具有不同的抗菌活性。
【作者单位】： 安徽农业大学茶与食品科技学院;安徽农业大学生命科学院;安徽农业大学动物科技学院;
【关键词】： 鸡β-防御素(AvBD) 串联表达 抑菌活性 质谱分析
【基金】：国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10Z320) 安徽省自主创新专项(13Z03090)
【分类号】：S852.2
【正文快照】： (a.College of Tea and Food Science and Technology;b.College of Life Sciences;c.College of Animal Science andTechnology,Anhui Agricultural University,Hefei 230036,China)防御素(defensin)是一类广泛存在于生物体内富含半胱氨酸的阳离子抗菌肽[1]。根据半胱氨酸残

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本文编号：591922