鸡ADRA1B和PPARGC1B基因在卵泡中的时空表达及其新SNPs对产蛋性状的遗传效应
本文关键词：鸡ADRA1B和PPARGC1B基因在卵泡中的时空表达及其新SNPs对产蛋性状的遗传效应
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【摘要】：ADRA1B基因是G蛋白偶联受体家族成员之一,它不仅可以激活有丝分裂,还可以调节许多细胞的生长和增殖。PPARGC1B基因是一种调控基因转录的共激活剂,对转录因子和核受体活动,脂肪氧化,糖酵解以及能量代谢等多种生物学过程具有调控作用。已有研究表明,ADRA1B和PPARGC1B基因在哺乳动物的卵巢中对卵泡的发育,筛选以及成熟也具有一定的调控作用。然而,目前国内外关于ADRA1B和PPARGC1B基因在鸡卵泡发育中的调控作用鲜有报道。因此,本研究采用RT-RCR和免疫组织化学方法探讨ADRA1B和PPARGC1B基因在鸡卵泡发育中的时空表达规律和特点;通过PCR-SSCP对候选基因进行序列单核苷酸多态性分析、筛选SNPs、进行产蛋性状关联分析,筛查与鸡产蛋性状相关的潜在分子标记,为育种工作者用于以鸡产蛋性状为主要育种目标的分子标记辅助育种选择提供依据。实验一,以150日龄海兰褐蛋鸡为供试材料,采用半定量RT-PCR方法测定分析鸡卵巢的间质组织、前等级卵泡和等级卵泡中ADRA1B和PPARGC1B基因mRNA表达水平。结果表明,ADRA1B基因mRNA在鸡的各等级卵泡中均有较低的相对表达量。其中,F2中ADRA1B基因mRNA相对表达量显著高于1-4mm、6-7mm、7-8mm、F4、F5,间质中相对表达量显著高于6-7mm、F4(P0.05),其他各等级卵泡中则差异不显著(P0.05)。PPARGC1B基因mRNA在各等级卵泡中均有表达且相对表达量差异显著(P0.05),等级前后均先下降再上升。其中,间质中PPARGC1B基因mRNA的相对表达量显著高于等级F3和F4(P㩳0.05),其他各等级卵泡中的相对表达量则差异不显著(P0.05)。实验二,以150日龄海兰褐蛋鸡为供试材料,采用免疫组织化学方法检测ADRA1B和PPARGC1B基因在卵巢不同前等级卵泡中的蛋白质表达定位。结果表明,ADRA1B基因在前等级卵泡的间质和卵母细胞中均检测到阳性信号,随着卵泡的生长发育,在大白卵泡颗粒细胞中也检测到阳性信号。PPARGC1B基因在前等级卵泡的间质和卵母细胞中均检测到阳性信号。实验三,以大骨鸡为供试材料,采用PCR-SSCP方法进行基因分型、序列比对,筛选出SNPs,进行产蛋性状关联分析。结果发现,ADRA1B基因在Exon2片段中检测到A1915G转换,此转换带来蛋白质氨基酸残基非同义替换(天冬氨酸-489-甘氨酸)。根据SNP A1915G将大骨鸡分为AA和AG基因型,其中,AA基因型为优势基因型。在30,43,57,66周龄产蛋量和30,43周龄蛋重的产蛋性状中,AG基因型显著高于AA基因型(P㩳0.05)。PPARGC1B基因在3’非编码区检测到T6146C转变,根据SNP T6146C将大骨鸡分为TT和TC基因型,其中,TT基因型为优势基因型。在57,66周龄产蛋量和30,43周龄蛋重的产蛋性状中,TC基因型显著高于TT基因型(P㩳0.05)。此证实,新SNPs为鸡产蛋性状潜在的分子标记,为用于以鸡产蛋性状为主要育种目标的分子标记辅助育种选择提供依据。
【关键词】：ADRA1B PPARGC1B 时空表达 关联分析 卵泡发育
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S831
【目录】：
- 摘要2-4
- Abstract4-7
- 第一篇 文献综述7-14
- 1.1 发育特点7-8
- 1.2 调控机制8-10
- 1.3 候选基因研究进展10-12
- 1.4 研究的目的及意义12-14
- 第二篇 研究内容14-43
- 第一章 鸡ADRA1B和PPARGC1B基因m RNA在不同等级卵泡中的表达特性分析14-24
- 1.1 材料与方法14-18
- 1.2 结果与分析18-22
- 1.3 讨论22-23
- 1.4 小结23-24
- 第二章 鸡卵巢中ADRA1B基因和PPARGC1B基因蛋白质表达分析24-29
- 2.1 实验材料及方法24-26
- 2.2 结果26-27
- 2.3 讨论27-28
- 2.4 小结28-29
- 第三章 鸡ADRA1B和PPARGC1B基因单核苷酸多态性与产蛋性状关联分析29-43
- 3.1 实验材料及方法29-34
- 3.2 结果与分析34-40
- 3.3 讨论40-42
- 3.4 小结42-43
- 结论43-44
- 参考文献44-50
- 作者简介50-51
- 致谢51
【参考文献】
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，本文编号：649625
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