携带BAC质粒DNA序列的重组伪狂犬病病毒变异株的构建和鉴定

发布时间：2017-08-12 06:04

  本文关键词：携带BAC质粒DNA序列的重组伪狂犬病病毒变异株的构建和鉴定

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【摘要】：本研究旨在以当前流行的伪狂犬病病毒变异株(TJ株)为基础,构建携带红色荧光蛋白(RFP)标记细菌人工染色体质粒的重组伪狂犬病病毒(PRV)。通过同源重组和Cre/lox P特异性位点重组的方法构建了重组病毒r PRVTJ-del TK-BAC-RFP株。PCR鉴定和测序分析结果表明,在重组病毒r PRVTJ-del TK-BAC-RFP株的基因组中已插入RFP标记的BAC质粒DNA序列;动力学参数分析表明,重组病毒的生长特性与PRV TJ株相似,尽管复制能力稍有降低,但与亲本株相比并无显著性差异;电镜检测结果显示,重组病毒与亲本病毒PRV TJ株的病毒粒子极其相似,均有囊膜,核心约为80 nm,核衣壳清晰可见。这为进一步研究PRV的变异机制奠定了基础。
【作者单位】： 吉林农业大学动物科学技术学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;
【关键词】： 伪狂犬病病毒 变异株TJ 细菌人工染色体
【基金】：国家自然科学基金面上项目(31570149)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 伪狂犬病(pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染猪、绵羊、山羊、牛等多种家畜及野生动物引起的一种以发热、奇痒(猪除外)、脑脊髓炎、呼吸和神经系统障碍为主要特征的急性传染病[1-3]。PRV是疱疹病毒科α疱疹病毒亚科水痘病毒属的成员,是一种具有神

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