添加剂对不同含水量多花黑麦草青贮发酵品质及微生物种群的影响

发布时间：2017-08-17 14:30

  本文关键词：添加剂对不同含水量多花黑麦草青贮发酵品质及微生物种群的影响

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【摘要】：本研究以中国南方地区优质牧草多花黑麦草(Lolium multiflorum Lam.)为试验材料,评价其在不同含水量(75%和65%)条件下添加不同添加剂(甲酸、植物乳杆菌(Lactobacillus plantment) 、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri))调制的青贮饲料的发酵品质；并在经过60天常规发酵后,各处理组在有氧条件下放置3天和7天后检测其有氧稳定性,探究在不同处理条件下多花黑麦草二次发酵情况。同时,利用PCR-DGGE技术检测青贮60天和有氧变败7天微生物种群多样性,反映多花黑麦草青贮中有益菌存在状况并确立优势菌株。试验结果如下：1.不同类型添加剂对发酵品质影响显著,甲酸处理组能在青贮初期快速降低青贮料pH值,抑制了微生物的活动,基本保存了青贮料原有的营养品质；植物乳杆菌在青贮初期pH值降低到4以下,乳酸含量显著高于其他处理组(P0.05),但在发酵中后期变化幅度较小,青贮效果较优；布氏乳杆菌添加组在60天青贮过程中,pH值一直高于甲酸和植物乳杆菌处理组,水溶性碳水化合物(WSC)下降和氨态氮／总氮(NH3-N/TN)上升幅度较大,特别是在青贮中后期(21-60d)变化幅度大于前期(0-21d),青贮效果虽优于对照组,但比甲酸和植物乳杆菌处理组差。含水量(75%和65%)对多花黑麦草青贮发酵品质的动态影响不显著(P0.05),本试验中设置的两个水分含量75%和65%均无渗出液,在不添加任何添加剂的情况下(对照组),依然能制成较优良的青贮料。2.在多花黑麦草青贮有氧变败时期,不同添加剂对其有氧稳定的影响差异显著(P0.05)。有氧变败3天时,甲酸和布氏乳杆菌处理组pH值上升幅度小于植物乳杆菌和对照组,到有氧变败7天时,只有布氏乳杆菌添加组pH值仍然保持在5以下,且就有氧稳定性也远高于其他处理组(超过150h)。综上所述,就多花黑麦草青贮有氧稳定性而言,布氏乳杆菌甲酸对照植物乳杆菌。3. DGGE结果表明,布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)在多花黑麦草青贮后期以及有氧稳定性中发挥着重要的作用。在青贮60天时,DGGE结果表明各处理菌群处于较稳定状态,布氏乳杆菌占据了发酵主导地位,但在个别处理组中检测到了芽孢杆菌(Bacillus)的存在；在有氧变败7天时,各处理中均检测到了好氧的肠杆菌(Enterobacter)的存在,但在布氏乳杆菌处理组中布氏乳杆菌仍为优势种群。综上所述,本试验中,多花黑麦草含水量在75%和65%时均能制成较优质的青贮料,考虑到晾晒时间过长会使牧草营养成分流失较多以及过低水分不利于压实等问题,将多花黑麦草水分控制在75%左右较适宜。同时,综合我国南方地区气候条件以及结合实际生产,在含水量75%条件下,添加甲酸或者布氏乳杆菌对于生产优质多花黑麦草青贮料以及防止青贮料二次发酵是可行且有效的。
【关键词】：不同处理 多花黑麦草 青贮 发酵品质 微生物
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S816
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 1. 立题背景10-11
• 2. 文献综述11-18
• 2.1 影响青贮品质的因素11-13
• 2.1.1 青贮原料含水量11
• 2.1.2 青贮原料缓冲能力11-12
• 2.1.3 青贮原料水溶性碳水化合物含量12
• 2.1.4 青贮体系中乳酸菌种类与数量12
• 2.1.5 青贮温度12-13
• 2.2 青贮化学及生物添加剂的应用13-15
• 2.2.1 酶制剂以及营养因子13
• 2.2.2 防腐剂13-14
• 2.2.3 非蛋白氮14
• 2.2.4 乳酸菌14-15
• 2.3 PCR-DGGE技术在青贮研究领域的应用15-16
• 2.4 青贮中有氧变败研究16-17
• 2.5 多花黑麦草青贮研究进展17
• 2.6 研究的目的与意义17-18
• 3. 研究的材料与方法18-24
• 3.1 试验地概况18
• 3.2 试验材料18
• 3.3 试验设计18-19
• 3.4 青贮料的制作19-20
• 3.5 试验测定项目与方法20-23
• 3.5.1 发酵品质与化学成分20
• 3.5.2 青贮饲料有氧变败20
• 3.5.3 青贮饲料微生物计数20-21
• 3.5.4 青贮饲料微生物多样性的测定21-23
• 3.6 数据处理23-24
• 4. 结果与分析24-45
• 4.1 多花黑麦草原料成分24-25
• 4.2 不同处理多花黑麦草青贮发酵品质的变化25-35
• 4.2.1 不同处理多花黑麦草pH值的变化25-27
• 4.2.2 不同处理多花黑麦草氨态氮/总氮的变化27-29
• 4.2.3 不同处理多花黑麦草乳酸含量的变化29-31
• 4.2.4 不同处理多花黑麦草乙酸含量的变化31-33
• 4.2.5 不同处理多花黑麦草水溶性碳水化合物的变化33-35
• 4.3 不同处理对多花黑麦草发酵有氧稳定性的影响35-36
• 4.4 不同处理对多花黑麦草青贮微生物种群的影响36-45
• 4.4.1 样品16s rDNA的V3区pcr扩增结果36-37
• 4.4.2 多花黑麦草青贮60天V3区pcr产物DGGE结果37-42
• 4.4.3 多花黑麦草青贮有氧变败7天V3区pcr产物DGGE结果42-45
• 5. 讨论与小结45-50
• 5.1 多花黑麦草原料化学成分45
• 5.2 不同处理多花黑麦草青贮发酵品质的变化45-48
• 5.3 不同添加剂对不同含水量多花黑麦草青贮有氧稳定性的影响48
• 5.4 不同处理对多花黑麦草青贮微生物种群的影响48-50
• 6. 结论与展望50-52
• 6.1 结论50-51
• 6.2 展望51-52
• 参考文献52-60
• 致谢60-61
• 附录61-66
• 攻读学位期间的学术论文情况66
• 攻读学位期间参与项目66

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