不同信号通路抑制剂对酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的影响

发布时间：2017-08-26 08:14

  本文关键词：不同信号通路抑制剂对酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的影响

  更多相关文章： β-防御素- 瘤胃上皮细胞 酿酒酵母菌 抑制剂 信号通路 实时荧光定量PCR

【摘要】：为了探索核因子-kB(nuclear factor-k-gene binding,NF-kB)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路是否介导益生性酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae,SC)诱导绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)基因表达的调控机制。首先建立绵羊瘤胃上皮细胞培养体系作为体外试验模型,将传代细胞分为4个试验组(SC+PDTC、SC+PD98059、SC+SB202190、SC+SP600125)、4个阴性对照组(PDTC、PD98059、SB202190、SP600125)、1个阳性对照组(SC)和1个空白对照组。向试验组和阴性对照组内分别加入NFkB通路特异性抑制剂PDTC(50μmol/L)、MAPKs通路ERK 1/2特异性抑制剂PD98059(20μmol/L)、p38特异性抑制剂SB202190(20μmol/L)和JNK特异性抑制剂SP600125(20μmol/L)4种抑制剂,作用1h后,用PBS将各组细胞清洗3次,然后向试验组和阳性对照组中分别添加浓度为5.2×107 CFU/mL的酿酒酵母菌液100μL,并向阴性对照组和空白对照组中分别添加等量的DMEM/F12培养液。将以上10组细胞置于37℃、5%CO2培养箱中培养12h后提取各组细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测各组SBD-1 mRNA表达水平的变化。结果显示:与阳性对照组相比,4种抑制剂对酿酒酵母菌促进瘤胃上皮细胞SBD-1的诱导表达都具有抑制作用,且存在极显著性差异(P0.01),而各阴性对照组与空白对照组相比差异均不显著(P0.05);4种抑制剂的抑制效果依次表现为SB202190PDTCSP600125PD98059,且SB202190抑制效果极显著高于PDTC(P0.01),而PDTC抑制效果与SP600125、PD98059相比差异均不显著(P0.05)。结果表明,NF-kB和MAPKs通路可能均介导酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,但可能以MAPKs途径为主要信号通路。
【作者单位】： 内蒙古农业大学兽医学院;农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室;
【关键词】： β-防御素- 瘤胃上皮细胞 酿酒酵母菌 抑制剂 信号通路 实时荧光定量PCR
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31160491;31560682)
【分类号】：S826
【正文快照】： 防御素(defensins)是近年来在生物界中发现的一类富含半胱氨酸的阳离子内源性抗菌肽,具有广谱的抗微生物活性,能参与机体抵抗微生物侵害的最初宿主防御活动,是内源性免疫体系的主要成分,在生物体的免疫反应中发挥着重要的作用[1]。哺乳动物防御素分为3类,即α-防御素、β-防御

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 王传耀,高美须,蒋梦月;大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及酿酒酵母菌的辐照致死剂量[J];核农学通报;1994年04期

2 夏青;谢田;文红梅;刘永翔;;8株国外引进的酿酒酵母菌的分类鉴定[J];贵州农业科学;2007年02期

3 牟岱英;刘红;蔡生力;钟立强;;酿酒酵母菌核糖体RNA沉降系数的初步研究[J];生物技术通报;2009年12期

4 岳田利;赵志华;王燕妮;袁亚宏;彭帮柱;高振鹏;;酿酒酵母菌胞内海藻糖提取工艺参数的优化[J];农业机械学报;2007年04期

5 张敬慧;;土壤中葡萄酒酿酒酵母菌种的选育[J];农产品加工(学刊);2011年04期

6 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 蒋耀庭;梁承红;;静电辅以激光对酿酒酵母菌的诱变效应研究[A];中国物理学会静电专业委员会第十二届学术年会论文集[C];2005年

2 王玉洁;黄玉屏;阮丽芳;刘楠;沈萍;;mel基因在酿酒酵母菌中的克隆和表达[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年

中国硕士学位论文全文数据库 前6条

1 金鑫;酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达及其信号通路初步研究[D];内蒙古农业大学;2016年

2 徐亚男;非酿酒酵母菌的筛选及产酶研究[D];石河子大学;2016年

3 罗剑辉;降血脂溶栓保健啤酒的初步研究[D];内蒙古农业大学;2012年

4 陈倩;民间酵面及相关基物中酿酒酵母菌的遗传多样性和群体分化研究[D];黑龙江大学;2012年

5 郭珍;酿酒酵母菌重要蛋白质HMO2的初步晶体学研究[D];重庆医科大学;2014年

6 李志刚;高产CLA酿酒酵母的筛选、诱变及其亚油酸异构酶的分离纯化[D];内蒙古农业大学;2010年

，

本文编号：740600