副猪嗜血杆菌HAPS_RS00465蛋白的免疫保护性及其基因缺失株生物学特性研究
发布时间：2017-08-26 23:18
本文关键词：副猪嗜血杆菌HAPS_RS00465蛋白的免疫保护性及其基因缺失株生物学特性研究
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【摘要】：副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, Hps)在一定条件下引起猪群发生生以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎等为特征的疾病,严重影响养猪业的发展。细菌肽ABC转运体底物结合蛋白不仅介导细菌将肽类转运进入细胞内提供营养,还参与许多重要的细胞活动,如细胞壁肽代谢循环、生物被膜形成、细胞间信号转导、致病性等。此外,一些肽ABC转运体底物结合蛋白还具有良好的免疫保护性。副猪嗜血杆菌HAPS_RS00465基因编码一种肽ABC转运体底物结合蛋白,为了初步明确该蛋白的免疫保护性,本研究对HAPS_RS00465基因进行了克隆表达,并以小鼠作为动物模型,对重组蛋白的免疫保护性进行了研究。同时,为了初步揭示HAPS_RS00465基因对副猪嗜血杆菌生物学特性产生的影响,本研究构建了HAPS_RS00465基因缺失株,并对基因缺失株的一些生物学特性进行了研究。研究结果如下：1.副猪嗜血杆菌HAPS_RS00465基因的克隆表达本研究以Hps M-3菌株的基因组为模板,PCR扩增其HAPS_RS00465基因,并将该基因克隆至T载体上。经XhoI和ScaI酶切后,将目的基因插入到表达载体pET-39b中。经PCR鉴定、酶切鉴定以及测序鉴定,成功构建了重组表达载体pET-39b-HAPS_RS00465。将重组表达载体转入表达菌BL21(DE3)中进行表达并对重组蛋白进行分离纯化,获得了HAPS_RS00465重组蛋白,分子量大小约70 kDa,与预期重组蛋白理论分子量大小一致。Western blot结果表明该重组蛋白能够与Hps M-3菌g愕耐妹庋宸从，
本文编号：743176
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