塞尼卡谷病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

发布时间：2017-08-29 11:32

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【摘要】：为建立一种快速、灵敏的塞尼卡谷病毒(SVV)检测方法,本研究针对病毒基因保守区域设计了一对引物和探针,并优化反应条件,建立了检测SVV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在2.8×107拷贝/μL~2.8×10~1拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;该方法与口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应;检测灵敏度可达2.8拷贝/μL,灵敏度高于普通PCR;批内和批间的变异系数为1.73%~4.00%,具有良好的稳定性。本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法可以用于SVV的检测,还可以作为诊断技术储备,应对我国未来可能出现流行的猪原发性疱疹病。
【作者单位】： 中国动物卫生与流行病学中心外来病研究中心;内蒙古农业大学兽医学院;
【关键词】： 塞尼卡谷病毒 荧光定量PCR TaqMan探针
【基金】：“十三五”国家重点研发计划(2016YFD0501104)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV),或称为Senecavirus A(SVA),在遗传上与小RNA病毒科、心病毒属病毒关系相近[1]。2015年9月以来,美国中西部多个地区的猪群发生呈水疱性病变疫情,感染猪的鼻吻、蹄冠状带部位出现水疱样病变,偶见腹泻症状,病情急促,新生仔猪病死率达30%~7

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