葛根素对奶牛乳腺上皮细胞炎症模型中NF-κB信号通路的影响

发布时间：2017-08-31 14:17

  本文关键词：葛根素对奶牛乳腺上皮细胞炎症模型中NF-κB信号通路的影响

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【摘要】：葛根素(puerarin,Pue)是从豆科植物葛根(Pueraria lobata)的根部提取的一种异黄酮,具抗炎作用。为探讨葛根素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的奶牛(Bos taurus)乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,b MECs)炎症的抗炎机制,本研究通过胶原酶消化法培养原代的b MECs,采用免疫荧光法鉴定b MECs中特有标记物人细胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK-18),Western blot检测β-酪蛋白(β-casein);细胞活力检测试剂盒(cell counting kit-8,CCΚ-8)筛选LPS刺激b MECs产生炎症反应的最佳浓度,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)的含量变化;将b MECs分成空白对照组、炎症模型组、葛根素药物组和地塞米松(dexamethasone,Dex)阳性对照组,用Western blot检测细胞中p-IκB-α、IκB-α、p-p65和p65蛋白的表达变化。研究发现,原代培养的细胞中存在特异性CΚ-18和β-casein,证明其为b MECs;经LPS刺激b MECs 24 h,炎症模型组细胞培养上清中TNF-α和IL-1β的含量比空白对照组显著升高(P0.05),证明b MECs炎症模型建立成功;葛根素处理组细胞中p-IκB-α蛋白较炎症模型组显著降低(P0.05),p-p65蛋白极显著降低(P0.01),且细胞培养液上清中TNF-α的含量极显著降低(P0.01),与地塞米松阳性对照组趋势一致,但两组无显著差异。结果表明,葛根素可通过抑制核转录因子(nuclear transcription factor-κappa B,NF-κB)信号通路的活化,降低其下游炎性因子TNF-α的表达,起到抗炎作用。本研究为临床上开发抗炎药物及治疗奶牛乳房炎打下了一定基础。
【作者单位】： 青岛农业大学动物科技学院;
【关键词】： 奶牛乳腺上皮细胞(bMECs) 脂多糖(LPS) 葛根素(Pue) 核转录因子(NF-κB)
【基金】：国家自然科学基金(No.31172378) 山东省农业技术体系创新团队岗位(No.SDAIT-12-011-03)
【分类号】：S853.7
【正文快照】： 奶牛(Bos taurus)乳房炎,通常是由病原微生物感染乳腺组织而发病,给奶牛养殖业造成巨大的经济损失(Zhao,Lacasse,2008)。临床上,抗生素治疗奶牛乳房炎是主要手段之一,但抗生素具有易残留、病原菌易产生耐药性、毒副作用大等弊端,对新型抗炎药物及抗炎机理的研究已成为热点。中

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 吴娟;王凤龙;王申元;;奶牛乳腺上皮细胞的原代培养[J];安徽农业科学;2009年06期

2 陈超;;葛根素抗炎作用研究进展[J];宁德师专学报(自然科学版);2010年03期

3 丁宁;姜勇;;细菌脂多糖识别系统[J];中国生物化学与分子生物学报;2007年09期

4 李U，

本文编号：766072