钼镉联合诱导对鸭脾脏氧化损伤及其相关基因表达的影响

发布时间：2017-09-06 22:44

  本文关键词：钼镉联合诱导对鸭脾脏氧化损伤及其相关基因表达的影响

  更多相关文章： 钼 镉 鸭 脾脏 炎症因子 凋亡基因

【摘要】：本研究旨在探讨钼镉联合诱导对鸭脾脏抗氧化功能及其相关基因表达的影响。试验选取360羽11日龄鸭,随机分为对照组和试验组(ⅰ组、ⅱ组、ⅲ组、ⅳ组和ⅴ组)。对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂添加不同剂量钼和镉的基础日粮,ⅰ-ⅴ组每千克日粮中钼、镉添加量分别为钼15mg、钼100mg、镉4mg、钼15mg+镉4mg、钼100mg+镉4mg。七钼酸铵[(NH4)6Mo7O24?4H2O]作为钼源,硫酸镉(3CdSO4?8H2O)作为镉源。试验期120d,在第30d、60d、90d、120d,各组分别随机选取鸭10羽采集翅静脉血及脾脏组织,用于白细胞数、脾脏指数、XOD、CAT、MDA、NOS指标测定和Bak-1、Bcl-2、Caspase-3、MT-1、CP、TNF-α、COX-2、NF-κB mRNA相对表达量的测定,观察脾脏组织的形态结构和脾细胞超微结构变化。试验结果如下:1、与对照组比较,高剂量钼镉联合组脾脏指数下降(P0.05);在90和120d,高剂量钼镉联合组血液中白细胞数量显著低于对照组和单独的钼组(P0.05)。2、钼镉联合组中脾脏MDA浓度显著高于其他四组(P0.01),NOS活性显著高于对照组和低剂量钼组(P0.01),CAT和XOD活性显著低于对照组和低钼组(P0.01);3、钼镉联合组脾脏组织结构出现充血、出血,红髓、白髓分界消失,鞘动脉管壁显著增厚等病理损伤,其损伤程度大于单独钼组和镉组;4、钼镉联合组脾脏超微结构出现核变形、固缩,线粒体嵴断裂、空泡化等损伤,其损伤程度大于单独钼组和镉组;5、钼镉联合组脾脏中Bak-1、Caspase-3、TNF-α、NF-κB、COX-2、MT-1 mRNA相对表达量均上升(P0.05或P0.01),Bcl-2和CP mRNA相对表达量均下降(P0.05或P0.01)。结论:钼镉及其联合可导致机体产生炎症反应,TNF-α、NF-κB、COX-2 mRNA相对表达量显著升高,抗氧化酶的活性降低,线粒体介导的细胞凋亡通路被激活,引起脾脏组织损伤,钼和镉呈协同作用。
【关键词】：钼 镉 鸭 脾脏 炎症因子 凋亡基因
【学位授予单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.32
【目录】：

• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 缩略词表格10-11
• 前言11-12
• 第一部分 文献综述12-17
• 1 钼的研究进展12-14
• 1.1 钼的性质12
• 1.2 钼的应用12
• 1.3 钼的生物学功能12-13
• 1.4 钼对动物的毒性作用13-14
• 1.4.1 钼对机体实质性器官的影响13
• 1.4.2 钼对机体相关抗氧化功能的影响13
• 1.4.3 钼对机体炎症因子的影响13-14
• 1.4.4 钼对机体细胞凋亡的影响14
• 2 镉的研究进展14-17
• 2.1 镉元素的基本介绍14
• 2.2 镉污染14-15
• 2.3 镉对动物的毒性作用15-17
• 2.3.1 镉对机体组织器官的影响15
• 2.3.2 镉对机体抗氧化系统功能的影响15
• 2.3.3 镉对机体炎症因子的影响15-16
• 2.3.4 镉对机体凋亡基因的影响16-17
• 第二部分 试验研究17-48
• 1 材料与方法17-24
• 1.1 试验材料17-20
• 1.1.1 试验动物及管理17
• 1.1.2 试验分组17
• 1.1.3 试验日粮17-19
• 1.1.4 试验所用主要仪器19
• 1.1.5 试验主要耗材19
• 1.1.6 试验所用主要试剂19-20
• 1.2 试验方法20-24
• 1.2.1 样品采集及处理20
• 1.2.2 脾脏指数的测定20
• 1.2.3 微量元素的测定20
• 1.2.4 血液中白细胞测定20
• 1.2.5 脾脏组织相关抗氧化指标的测定20-21
• 1.2.6 脾脏石蜡切片的制作21
• 1.2.7 脾脏超微结构切片的制作21
• 1.2.8 脾脏相关基因mRN表达量测定方法21-24
• 1.2.8.1 测定基因引物的设计与合成21-22
• 1.2.8.2 脾脏组织总RNA提取与纯度测定22
• 1.2.8.3 去基因组DNA和反转录22
• 1.2.8.4 RT-PCR反应22-23
• 1.2.8.5 相对定量计算方法23-24
• 1.3 数据分析24
• 2 结果与分析24-37
• 2.1 钼镉联合对鸭脾脏指数的影响24
• 2.2 钼镉联合对鸭血液中白细胞数的影响24-25
• 2.3 钼镉联合对鸭脾脏组织中抗氧化功能指标的影响25-27
• 2.3.1 钼镉联合对脾脏组织中MDA含量的影响25-26
• 2.3.2 钼镉联合对脾脏组织中XOD活性的影响26
• 2.3.3 钼镉联合对脾脏组织中CAT活性的影响26-27
• 2.3.4 钼镉联合对脾脏组织中NOS活性的影响27
• 2.4 钼镉联合诱导对鸭脾脏组织中相关基因mRNA相对表达量的影响27-32
• 2.4.1 钼镉联合对鸭脾脏组织中凋亡基因mRNA相对表达量的影响27-28
• 2.4.2 钼镉联合对鸭脾脏组织中炎症因子mRNA相对表达量的影响28-31
• 2.4.3 钼镉联合对鸭脾脏组织中MT-1 mRNA相对表达量的影响31
• 2.4.4 钼镉联合对鸭脾脏组织中CP mRNA相对表达量的影响31-32
• 2.5 钼镉联合对鸭脾脏病理组织学影响32-33
• 2.6 钼镉联合对鸭脾脏细胞超微结构的影响33-37
• 3 讨论37-46
• 3.1 钼镉联合对鸭脾脏指数的影响37
• 3.2 钼镉联合对鸭血液中白细胞数的影响37-38
• 3.3 钼镉联合对鸭脾脏组织中抗氧化功能指标的影响38-40
• 3.3.1 钼镉联合对鸭脾脏组织中MDA含量的影响38
• 3.3.2 钼镉联合对鸭脾脏组织中XOD活性的影响38-39
• 3.3.3 钼镉联合对鸭脾脏组织中CAT活性的影响39
• 3.3.4 钼镉联合对鸭脾脏组织中NOS活性的影响39-40
• 3.4 钼镉联合诱导对鸭脾脏组织中相关基因mRNA相对表达量的影响40-45
• 3.4.1 钼镉联合对鸭脾脏组织中凋亡基因mRNA相对表达量的影响40-42
• 3.4.2 钼镉联合对鸭脾脏组织中炎症因子mRNA相对表达量的影响42-44
• 3.4.3 钼镉联合对鸭脾脏组织中MT-1 mRNA相对表达量的影响44-45
• 3.4.4 钼镉联合对鸭脾脏组织中CP mRNA相对表达量的影响45
• 3.5 钼镉联合对鸭脾脏病理组织学和细胞超微结构的影响45-46
• 4 结论46-48
• 参考文献48-55
• 致谢55

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本文编号：805894