鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用

发布时间：2017-09-07 05:08

  本文关键词：鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用

  更多相关文章： 鸡传染性贫血病毒 实时荧光定量PCR 弱毒疫苗 污染

【摘要】：为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·μL~(-1),比常规PCR灵敏度高100倍。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克病病毒等病毒基因均无交叉反应,具有很好的特异性;批内重复和批间重复显示变异系数均小于2%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,该方法能够检测到1 000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的39种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性。上述结果表明,本研究建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可用于检测疫苗中CIAV低剂量的污染。
【作者单位】： 山东农业大学动物医学院;
【关键词】： 鸡传染性贫血病毒 实时荧光定量PCR 弱毒疫苗 污染
【基金】：农业部财政项目“禽垂直传播性疾病诊断技术研究”
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemiavirus,CIAV)可引起雏鸡骨髓造血组织和胸腺等淋巴组织的萎缩,并导致感染鸡发生贫血和免疫抑制。自1979年日本学者首次报道CIAV以来[1],CIAV感染已在我国及其他国家普遍存在[2-6]。由于CIAV感染非常普遍并可以通过种蛋垂直传播,在养

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 王柳,杨志彪,刘红全,智海东,仇华吉,童光志;马传染性贫血病病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建[J];中国预防兽医学报;2000年S1期

2 薛飞,朱远茂,王晓钧,杨建德,相文华,刘志英,赵立平,吕晓玲,沈荣显;马传贫驴白细胞弱毒疫苗株基质蛋白基因的克隆与表达[J];中国预防兽医学报;2003年01期

3 苏循志;浸头法接种雏鸡弱毒疫苗效果好[J];河南科技;1999年09期

4 薛飞,朱远茂,杨建德,王晓钧,相文华,赵立平,吕晓玲,沈荣显;马传贫驴白细胞弱毒疫苗株酸性蛋白p9基因的克隆与表达[J];中国生物工程杂志;2003年05期

5 刘忠华,钟翎,贺星亮,徐耀基,黄韧;用PCR技术鉴定犬细小病毒弱毒疫苗株[J];中国兽医学报;2003年05期

6 徐振东,孙莉,周金法,吴保成,王万忠;新城疫V_4克隆株弱毒疫苗研究[J];中国兽医杂志;1997年08期

7 张宝山,刘永刚,卢景良,孔宪刚,刘胜旺,杨威,马云燕;马传贫病毒白细胞弱毒疫苗毒株反转录酶基因克隆及序列分析比较[J];中国预防兽医学报;2000年02期

8 邓树国,刘爱玲,吴学进;鸡IBD野毒污染鸡场的免疫防制[J];中国禽业导刊;1999年02期

9 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 薛飞;贾斌;朱远茂;王晓钧;杨建德;相文华;赵立平;吕晓玲;沈荣显;;马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年（1993—2003）论文集[C];2003年

2 薛飞;朱远茂;王晓钧;杨建德;相文华;刘志英;赵立平;吕晓玲;沈荣显;;马传贫驴白细胞弱毒疫苗株基质蛋白基因的克隆与表达[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年（1993—2003）论文集[C];2003年

3 薛飞;朱远茂;杨建德;王晓钧;相文华;赵立平;吕晓玲;沈荣显;;马传贫驴白细胞弱毒疫苗株酸性蛋白p9基因的克隆与表达[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年（1993—2003）论文集[C];2003年

，

本文编号：807570