有机酸对肉鸡生产过程中弯曲菌作用的初步研究

发布时间：2017-09-07 08:44

  本文关键词：有机酸对肉鸡生产过程中弯曲菌作用的初步研究

  更多相关文章： 弯曲菌 有机酸 抑菌 酸应激 评价

【摘要】：弯曲菌是严重威胁人类健康的食源性病原菌之一。在肉鸡初级生产阶段饲喂抗生素是防控弯曲茵的传统手段,但由于抗生素的使用存在较大安全隐患,寻找其替代品成为研究热点。本研究通过体外实验筛选饲用有机酸并将其添加到肉鸡饮水中,从肉鸡弯曲菌携带量、肠道、生产性能及弯曲菌酸应激等方面评价有机酸的应用价值,为弯曲菌防控提供新技术。一、体外培养条件下有机酸对弯曲菌生长的影响从《GB 2760-2011食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中选取丙酸、柠檬酸、乳酸等7种有机酸,在体外培养条件下选择弯曲菌及有机酸的浓度,筛选出抑菌效果显著的有机酸,比较其抑制效率,并从细胞结构及代谢等方面探究有机酸对弯曲菌的影响。体外培养实验选择弯曲菌接种浓度为5×108CFU/mL、有机酸的评价浓度为0.1%(w/v)。有机酸筛选结果表明,丙酸、酒石酸和苹果酸对弯曲菌的生长抑制效果显著。抑菌效率的比较结果表明,0.1%丙酸、0.1%酒石酸及0.15%苹果酸均可在培养20 h时将弯曲菌浓度降低至不可检测范围。扫描电镜观察结果显示,丙酸组弯曲菌细胞壁明显皱缩,甚至出现孔洞；酒石酸组和苹果酸组大部分菌体细胞壁皱缩且在极端出现球形结构,并有细菌出现解体现象。细菌内容物外泄的检测结果表明,0.1%丙酸和0.15%苹果酸可使弯曲菌细胞膜受损,内容物大量渗出。细菌糖代谢的检测结果显示,丙酸组和苹果酸组弯曲菌培养上清中总糖浓度高于对照组,但无显著差异(P0.05)。细菌磷代谢的测定结果显示,0.15%苹果酸可使弯曲菌培养上清中磷的浓度显著降低(P0.05)。以上结果表明,丙酸、酒石酸和苹果酸对弯曲菌的生长抑制效果显著,改变细胞壁形态；丙酸和苹果酸可破坏其细胞壁结构,导致细胞通透性增加,进而使细菌内容物外泄；苹果酸可显著影响弯曲菌磷代谢(P0.05),而丙酸和酒石酸对弯曲菌代谢无显著影响(P0.05)。二、 有机酸对肉鸡生产过程中弯曲菌携带量的影响将丙酸、酒石酸和苹果酸分别添加到肉鸡日常饮水中,使其饮水pH为4.0(终浓度分别为0.253%、0.059%和0.075%)。在有机酸饲喂当天及饲喂后的第1、2、3周监测肉鸡泄殖腔弯曲菌检出率、携带量和肠道总菌落数,比较日常饲喂3种有机酸的作用效果。肉鸡泄殖腔弯曲菌检测结果表明,日常饲喂有机酸1周时苹果酸组肉鸡泄殖腔弯曲菌数量显著降低0.41-0.48个数量级(P0.05),抑菌率达61.10-66.88%,而丙酸和酒石酸作用效果不稳定；日常饲喂有机酸第2周,各有机酸处理组泄殖腔弯曲菌数量均与对照组无显著性差异(P0.05)；日常饲喂有机酸第3周,除AA肉鸡丙酸组外各有机酸处理组泄殖腔弯曲菌数量均显著高于对照组(P0.05)。肉鸡肠道总菌落数检测结果表明,饲喂有机酸1周时各有机酸处理组麻鸡肠道总菌落数均显著高于对照组(P0.05),日常饲喂有机酸2-3周时丙酸组和苹果酸组肉鸡肠道总菌落数与对照组无显著差异(P0.05)。日常饲喂苹果酸1周时对肉鸡弯曲菌作用效果最好,且对肠道微生态平衡影响最小。将浓度为0.15%、0.225%、0.4%、0.8%、1.2%的苹果酸添加入屠宰日龄肉鸡饮水中,在饲喂的当天及饲喂后的第2天和第5天分别检测肉鸡泄殖腔及肠道弯曲菌携带量,同时监测肠道总菌落数。肉鸡泄殖腔弯曲菌检测结果显示,0.15%苹果酸饲喂5天可使麻鸡泄殖腔弯曲菌数量显著下降1.55个数量级(P0.05),抑菌率达97.18%；1.2%苹果酸组饲喂5天可使AA肉鸡泄殖腔弯曲菌携带量显著降低0.75个数量级(P0.05),抑菌率达82.22%,但效果不及0.15%苹果酸；而其他各浓度苹果酸对肉鸡泄殖腔弯曲菌数量无显著影响(P0.05)。肉鸡盲肠中弯曲菌携带量检测结果表明,0.4%和0.8%苹果酸饲喂5天时AA肉鸡盲肠中弯曲菌数量分别显著降低1.56和1.35个数量级(P0.05),抑菌率分别为97.25%和95.53%。肉鸡空肠中弯曲菌携带量检测结果表明,0.8%苹果酸饲喂5天时AA肉鸡空肠中弯曲菌检出率显著降低80%(P0.05)。肠道总菌落数检测结果显示,0.15%苹果酸对肉鸡肠道微生物区系无显著影响(P0.05)。三、有机酸对肉鸡肠道、生产性能及弯曲菌分离株酸应激相关基因的影响肠道测定指标分为肠道总重、长度及pH,生产性能测定指标分为体重、平均日增重、淘汰率及肉品质。肉鸡肠道总重的测定结果表明,日常或屠宰日龄饲喂有机酸对肉鸡的肠道总重均无显著影响(胗0.05)。肉鸡肠道长度测定结果表明,日常饲喂丙酸的麻鸡盲肠长度增加了12.89%(P0.05),苹果酸和酒石酸对肠道长度无显著影响(P0.05)；屠宰日龄饲喂苹果酸对肠道长度无显著影响(P0.05)。肉鸡肠道pH值测定结果表明,酒石酸组麻鸡空肠pH值降低了2.44%(P0.05),苹果酸组AA肉鸡盲肠pH值降低了5.47%(P0.05)。肉鸡生长性能测定结果显示,日常饲喂苹果酸可显著增加AA肉鸡平均日增重(P0.05),丙酸可显著降低肉鸡淘汰率(P0.05)：而屠宰日龄饲喂苹果酸对肉鸡体重及平均日增重无显著影响(P0.05)。肉鸡肌肉常规成分检测结果显示,日常饲喂丙酸和苹果酸对肉鸡肉品质无显著不良影响(P0.05),日常饲喂酒石酸对腿肌粗脂肪和粗灰分含量有显著影响(P0.05)：屠宰日龄饲喂0.15%苹果酸5天可以显著升高胸腿肌水分含量并降低腿肌粗脂肪含量(P0.05),表明0.15%苹果酸的使用可显著改善鸡肉的风味及口感。对161株弯曲菌分离株酸应激相关基因的检测表明,有机酸的长期使用不会导致弯曲菌酸应激相关基因分布的显著变化。
【关键词】：弯曲菌 有机酸 抑菌 酸应激 评价
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S831.5
【目录】：

• 中文摘要2-5
• Abstract5-11
• 符号说明11-12
• 综述 机酸在养殖环节对弯曲菌防控的研究进展12-22
• 1 弯曲菌的危害及来源12
• 2 饲用有机酸对家禽肠道微生物的影响12-13
• 2.1 降低细菌产能效率13
• 2.2 改变细菌膜结构及通透性13
• 2.3 提高胞内渗透压13
• 2.4 抑制生物大分子合成13
• 3 有机酸对家禽其他组织的作用机制13-15
• 3.1 降低肠道pH13-14
• 3.2 增强机体免疫性能14
• 3.3 延缓胃排空的速度14
• 3.4 提高饲料采食量及利用率14-15
• 3.5 改善饲养环境15
• 4 有机酸在饲养环节对弯曲菌防控的应用途径15-16
• 4.1 通过处理饮用水防治15
• 4.2 通过日粮中添加防治15-16
• 5 有机酸应用中的问题及发展前景16-17
• 5.1 有机酸在应用过程中存在的问题16-17
• 5.2 有机酸的应用前景17
• 参考文献17-22
• 第一章 体外培养条件下有机酸对弯曲菌生长的影响22-35
• 1 材料22-23
• 1.1 菌株22
• 1.2 主要试剂22
• 1.3 主要仪器设备22-23
• 2 方法23-25
• 2.1 弯曲菌接种浓度的选择23
• 2.2 有机酸浓度的选择23
• 2.3 有机酸的筛选23
• 2.4 不同浓度有机酸对弯曲菌抑制效率的比较23-24
• 2.5 有机酸对弯曲菌细胞结构的影响24
• 2.6 有机酸对弯曲菌代谢的影响24-25
• 3 结果25-31
• 3.0 接种细菌浓度的选择25
• 3.1 酸浓度的选择25-26
• 3.2 有机酸的筛选26-27
• 3.3 不同浓度有机酸对弯曲菌抑制效率的比较27-28
• 3.4 有机酸对细胞结构的影响28-30
• 3.5 有机酸对弯曲菌代谢的影响30-31
• 4 讨论31-33
• 参考文献33-35
• 第二章 有机酸对肉鸡生产过程中弯曲菌携带量的影响35-50
• 1 材料35
• 1.1 主要试剂35
• 1.2 主要仪器设备35
• 2 方法35-37
• 2.1 实验设计35-36
• 2.2 饲养管理36
• 2.3 测定指标与方法36-37
• 2.4 数据计算与统计37
• 3 结果分析37-45
• 3.1 有机酸对肉鸡泄殖腔弯曲菌阳性率的影响37-38
• 3.2 有机酸对肉鸡弯曲菌携带量的影响38-44
• 3.3 有机酸对肉鸡肠道菌落总数的影响44-45
• 4 讨论45-47
• 参考文献47-50
• 第三章 有机酸对肉鸡肠道、生长性能及弯曲菌分离株酸应激相关基因分布的影响与分析50-71
• 1 材料50-51
• 1.1 菌株50
• 1.2 主要试剂50-51
• 1.3 主要仪器设备51
• 2 方法51-53
• 2.1 肉鸡肠道总重、长度及pH值的测定51
• 2.2 肉鸡生产性能的测定及计算方法51
• 2.3 数据处理与统计分析51-52
• 2.4 饲喂有机酸过程中弯曲菌分离株酸应激相关基因的检测52-53
• 3 结果53-65
• 3.1 日常饲喂有机酸对肉鸡肠道的影响53-54
• 3.2 苹果酸对屠宰日龄肉鸡肠道的影响54-55
• 3.3 日常饲喂有机酸对肉鸡生产性能的影响55-58
• 3.4 苹果酸对屠宰日龄肉鸡生产性能的影响58-60
• 3.5 鸡源弯曲菌分离株中酸应激相关基因分布变化分析60-65
• 4 讨论65-67
• 参考文献67-71
• 攻读硕士学位期间发表论文目录71-72
• 致谢72-73

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本文编号：808553