布鲁氏菌VirB5基因的原核表达及生物信息学分析

发布时间：2017-09-09 08:15

  本文关键词：布鲁氏菌VirB5基因的原核表达及生物信息学分析

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【摘要】：[目的]获得高效表达并且抗原性较好的VirB5蛋白,并分析其生物信息学功能。[方法]以羊种布鲁氏菌16M基因组为模板扩增VirB5基因,连接表达载体p ET-32a,并转化至大肠杆菌(DE3)中表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测其免疫学特性,采用信息生物学方法对VirB5基因编码蛋白的理化性质、结构、保守结构域进行分析。[结果]成功克隆出VirB5基因,并在大肠杆菌中成功表达,SDS-PAGE和Western Blot证实表达重组蛋白对布鲁氏菌阳性血清具有反应原性,生物信息学方法推测VirB5基因可能在胞内运输功能方面发挥重要作用。[结论]成功克隆出717bp大小的VirB5基因,并在大肠杆菌中成功表达45 k Da大小的蛋白,具有良好的抗原性,且证明VirB5蛋白与布鲁氏菌的胞内运输相关。
【作者单位】： 石河子大学动物科技学院;
【关键词】： 布鲁氏菌 VirB蛋白 原核表达 Western Blot 生物信息学分析
【基金】：国家自然科学基金项目(“布鲁氏菌外膜蛋白OMP25对宿主细胞自噬/凋亡信号通路的调控机制研究”,No.31460650)和(“TceSR和TcfSR在布鲁氏菌致病过程中的分子调控机制研究”,No.31572491)
【分类号】：S852.61
【正文快照】： 布鲁氏菌(Brucella)是一种胞内寄生的革兰氏阴性菌,能够引起以流产和波浪热为特征的人兽共患传染病,并导致严重的社会经济和卫生安全问题[1-2]。人和动物感染后表现为流产及不孕不育等症状[3-4]。最近几年,布鲁氏菌病在我国依旧存在不同程度的流行,尤其是在新疆、内蒙古、河北

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1 任璐;牛布鲁氏菌毒力基因VirB5间接ELISA检测方法的建立及应用[D];黑龙江八一农垦大学;2016年

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本文编号：819294