麒麟鸡、怀乡鸡肉品质性状及GPAT基因多态性研究
发布时间：2017-09-12 06:17
本文关键词：麒麟鸡、怀乡鸡肉品质性状及GPAT基因多态性研究
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【摘要】：本试验以麒麟鸡和怀乡鸡2个品种为试验素材,对12、14、16周龄的肌肉、脂肪组织学和肌肉肌苷酸含量进行测定;利用PCR-SSCP技术对肌苷酸合成代谢中的关键酶基因GPAT的SNPs位点进行筛查;采用RT-PCR技术分析GPAT基因在肉鸡不同组织不同时间的表达规律。旨在通过群体水平、个体水平和基因水平三个方面对鸡肉肌苷酸含量遗传规律进行探讨,为肉鸡高肌苷酸含量的标记辅助选择提供科学参考。本研究结果表明:(1)肌肉脂肪组织学:12周龄麒麟公鸡脂肪体积显著高于怀乡公鸡(P0.05),14周龄时怀乡母鸡脂肪体积极显著高于麒麟母鸡(P0.01);麒麟鸡胸肌纤维根数显著高于怀乡鸡(P0.05),怀乡鸡胸肌纤维直径、腿肌纤维根数极显著或显著高于麒麟鸡(P0.05/P0.01)。(2)肌肉肌苷酸含量:12、16周龄怀乡鸡胸肌中肌苷酸含量都显著高于14周龄(P0.05),16周龄怀乡鸡腿肌中肌苷酸含量分别显著高于12周龄(P0.05)和14周龄(P0.05);16周龄麒麟鸡胸肌中肌苷酸含量分别显著高于12周龄(P0.05)和14周龄(P0.05),14周龄麒麟鸡腿肌中肌苷酸含量显著和极显著高于12周龄(P0.05)和16周龄(P0.01)。(3)单核苷酸多态性:麒麟鸡、怀乡鸡和贵妃鸡三个鸡种GPAT基因上第34787bp处发现了1个SNP位点(G34993A),该位点碱基的突变导致了原编码谷氨酰胺(Gln)突变为终止密码子,该突变为无义突变。三个鸡种G34993A位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态,麒麟鸡、怀乡鸡和贵妃鸡的PIC值分别为0.253、0.303和0.297,三个群体的PIC都处于中度多态,群体遗传结构稳定。这说明了三个鸡种都有丰富的遗传信息,具有一定的遗传多样性和育种潜力。(4)GPAT基因表达:GPAT基因在麒麟鸡各组织表达量随日龄增加均呈下降趋势,而怀乡鸡各组织表达量则随日龄增加呈先升后降的变化,这表明两个品种对体内肌苷酸合成的调控机制存在差异;麒麟鸡和怀乡鸡GPAT基因三个时间点中肝脏的表达量最高;麒麟鸡和怀乡鸡肝脏的GPAT表达量与腿肌肌苷酸含量呈负相关。这可能与品种间差异有关,麒麟鸡全身羽毛翻卷,具有良好的抗热性,能减少高温应激对肝脏的损伤。
【关键词】：麒麟鸡 怀乡鸡 肉品质 肌苷酸候选基因 单核苷酸多态性位点
【学位授予单位】：广东海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S831
【目录】：
- 摘要4-5
- Abstract5-10
- 英文缩写词表10-11
- 1 文献综述11-18
- 1.1 肉品质性状研究进展11-13
- 1.1.1 肉品质性状的定义11-12
- 1.1.2 鸡肉品质性状的因素12-13
- 1.2 肌苷酸的研究进展13-15
- 1.2.1 肌苷酸的特性概述13
- 1.2.2 肌苷酸的合成代谢13-14
- 1.2.3 影响畜禽肌苷酸含量的因素14-15
- 1.3 肌苷酸相关候选GPAT基因的研究进展15-16
- 1.3.1 GPAT基因结构概述15-16
- 1.3.2 畜禽GPAT基因的相关研究16
- 1.4 研究目的与意义16-18
- 2 麒麟鸡、怀乡鸡脂肪与肌肉组织学特性观察18-25
- 2.1 试验材料和方法18-19
- 2.1.1 试验动物和饲养管理18
- 2.1.2 脂肪与肌肉组织学特性观察内容和方法18-19
- 2.1.3 统计方法19
- 2.2 结果与分析19-23
- 2.2.1 麒麟鸡怀乡鸡脂肪组织学观察与统计结果19-20
- 2.2.2 麒麟鸡怀乡鸡肌肉组织学观察与统计结果20-23
- 2.3 讨论23-24
- 2.3.1 麒麟鸡怀乡鸡脂肪组织学特性比较分析23-24
- 2.3.2 麒麟鸡怀乡鸡肌肉组织学特性比较分析24
- 2.4 小结24-25
- 3 麒麟鸡、怀乡鸡肌肉肌苷酸含量测定25-29
- 3.1 试验材料和方法25
- 3.1.1 试验动物和饲养管理25
- 3.1.2 肌肉肌苷酸含量测定内容和方法25
- 3.1.3 统计方法25
- 3.2 结果与分析25-27
- 3.2.1 肌苷酸标准曲线和鸡肉样品液相色谱图25-27
- 3.2.2 麒麟鸡怀乡鸡肌苷酸含量的测定结果27
- 3.3 讨论27-28
- 3.3.1 日龄对肌肉肌苷酸含量的影响27
- 3.3.2 品种对肌肉肌苷酸含量的影响27-28
- 3.4 小结28-29
- 4 GPAT基因的SNP位点多态性分析29-39
- 4.1 材料和方法29-33
- 4.1.1 试验材料29
- 4.1.2 主要仪器设备29
- 4.1.3 主要试验试剂及配制29-30
- 4.1.4 基因组DNA的抽提与检测30
- 4.1.5 GPAT基因SNPs多态性位点的筛查30-32
- 4.1.6 多态片段测序32
- 4.1.7 数据统计分析32-33
- 4.2 结果与分析33-37
- 4.2.1 GPAT基因SNPs多态性位点筛查结果33-34
- 4.2.2 PCR-SSCP检测结果34-35
- 4.2.3 GPAT基因群体遗传学统计分析35-36
- 4.2.4 GPAT基因SNP位点遗传多态性分析36-37
- 4.3 讨论37-38
- 4.3.1 GPAT基因SNPs位点分析37
- 4.3.2 SNP位点多态性分析37-38
- 4.4 小结38-39
- 5 GPAT基因在组织中时空表达规律研究39-47
- 5.1 材料与方法39-42
- 5.1.1 试验材料39
- 5.1.2 主要仪器设备39
- 5.1.3 主要试剂39-40
- 5.1.4 总RNA的提取与检测40
- 5.1.5 总RNA反转录40
- 5.1.6 引物设计与合成40-41
- 5.1.7 PCR产物的检测41
- 5.1.8 实时荧光定量PCR41-42
- 5.2 结果与分析42-45
- 5.2.1 组织总RNA电泳结果42
- 5.2.2 荧光定量PCR扩增产物检测42-43
- 5.2.3 实时荧光定量PCR产物的特异性43
- 5.2.4 实时荧光定量的扩增效率43-44
- 5.2.5 麒麟鸡、怀乡鸡各组织GPAT基因的表达量44-45
- 5.2.6 麒麟鸡怀乡鸡GPAT基因表达水平与肌苷酸含量关联分析45
- 5.3 讨论45-46
- 5.3.1 RT-PCR的选择45-46
- 5.3.2 GPAT基因时空表达规律研究46
- 5.3.3 GPAT基因表达水平与肌苷酸含量的相关性分析46
- 5.4 小结46-47
- 6 结论47-48
- 参考文献48-55
- 致谢55-56
- 作者简介56-57
- 导师简介57
【参考文献】
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本文编号：835554
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