河南部分猪场猪鼻支原体感染情况调查及分离鉴定

发布时间：2017-09-17 14:03

  本文关键词：河南部分猪场猪鼻支原体感染情况调查及分离鉴定

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【摘要】：猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis,Mhr)是猪鼻腔内常在的寄生菌,是从猪体内首先被分离出来的支原体。Mhr是引起猪多发性浆膜炎、胸膜炎、肺炎、心包炎、关节炎、中耳炎等疾病的主要病原,该病在猪群中发病率高,死亡率低。Mhr的感染主要通过呼吸道传播,通常是由母猪或大猪传给小猪。临床上Mhr常与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪肺支原体(Mhp)等混合感染,造成严重的猪呼吸道综合征,致使断奶仔猪的死亡率显著升高,给养猪业造成巨大的经济损失。本研究对河南省5个地区12个规模化猪场Mhr感染情况进行了临床和分子生物学调查、与PRRSV、PCV-2、Mhp混合感染情况调查以及Mhr分离鉴定等研究,初步掌握了河南省部分规模化猪场Mhr感染的流行特征、与PRRSV、PCV-2、Mhp混感情况以及Mhr分离培养特性,为河南省部分规模化猪场诊断、预防和控制Mhr的感染提供了科学依据,为Mhr与PRRSV、PCV2和Mhp混合感染情况提供了数据,为Mhr的分离培养鉴定提供了方法。为了解Mhr在河南省部分规模化猪场的感染情况,与PRRSV、PCV-2、Mhp混合感染情况,对河南省12个规模化猪场进行了临床问卷调查、对有呼吸道症状疑似Mhr感染的病猪剖检取样并进行实验室检测。结果显示:Mhr感染主要发生在秋冬季节,以保育猪较易感染,病死率低,易与其它病原混感,混感后病死率增高。30份有呼吸道症状疑似Mhr感染病料中,Mhr阳性19份,阳性率为63.33%,Mhp阳性5份,阳性率为17.24%。Mhr与PRRSV、PCV-2混感率分别高达36.84%和42.10%。为获得临床Mhr感染流行菌株,便于对临床Mhr菌株研究,通过PPLO液体、固体培养基培养、纯化,经染色镜检、PCR鉴定、测序比对,获得一株Mhr分离株HNP502015,建立了Mhr分离鉴定方法,为进一步研究Mhr奠定了基础。
【关键词】：Mhr PRRSV PCV-2 混合感染调查 分离鉴定
【学位授予单位】：河南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.28
【目录】：

• 致谢4-8
• 摘要8-9
• 第一章 文献综述9-21
• 1 猪鼻支原体的在国内外的研究现状9-13
• 1.1 猪鼻支原体的感染现状9
• 1.2 猪鼻支原体病原学研究进展9-13
• 1.2.1 分类及结构特点9-10
• 1.2.2 基因组和蛋白质10-11
• 1.2.3 形态染色及培养特性11-12
• 1.2.4 猪鼻支原体的致病性12-13
• 2 猪鼻支原体诊断方法的研究进展13-16
• 2.1 病原学诊断检测14-15
• 2.1.1 分离培养14
• 2.1.2 PCR方法14-15
• 2.1.3 实时荧光定量PCR15
• 2.2 血清学诊断检测15-16
• 2.2.1 间接血凝试验15
• 2.2.2 酶联免疫吸附试验15-16
• 2.2.3 间接免疫荧光试验16
• 2.3 胶体金免疫层析检测技术16
• 3 猪鼻支原体感染的临床症状及防治措施16-17
• 3.1 猪鼻支原体感染的临床症状16
• 3.2 猪鼻支原体感染的病理变化16-17
• 3.3 猪鼻支原体的防治17
• 3.3.1 饲养环境的控制17
• 3.3.2 药物的治疗17
• 4 猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪圆环病毒2型17-21
• 4.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒17-19
• 4.1.1 病原学18
• 4.1.2 临床症状18
• 4.1.3 剖检变化18
• 4.1.4 致病机理18-19
• 4.1.5 猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪鼻支原体混感情况19
• 4.2 猪圆环病毒2型19-21
• 4.2.1 病原学19
• 4.2.2 临床症状19-20
• 4.2.3 剖检症状20
• 4.2.4 致病机理20
• 4.2.5 猪圆环病毒2型与猪鼻支原体混感情况20-21
• 第二章 河南部分规模化猪场Mhr感染情况临床调查及与PRRSV、PCV-2、Mhp混合感染情况调查21-34
• 引言21
• 1 材料与方法21-26
• 1.1 材料21-22
• 1.1.1 样品来源21
• 1.1.2 主要试剂21-22
• 1.2 方法22-26
• 1.2.1 临床问卷调查22
• 1.2.2 病猪剖检和样品采集22-23
• 1.2.3 组织样品的处理23
• 1.2.4 组织样品病原的DNA、RNA提取23-24
• 1.2.5 猪鼻支原体、猪肺支原体的PCR检测24-25
• 1.2.6 猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-PCR25
• 1.2.7 猪圆环病毒2型的PCR扩增25-26
• 2 结果与分析26-32
• 2.1 临床问卷调查结果26-27
• 2.2 病理剖检结果27
• 2.3 相关病原的PCR检测结果27-28
• 2.4 各病原混感情况分析28-32
• 3 结论与讨论32-34
• 3.1 结论32
• 3.2 讨论32-34
• 第三章 猪鼻支原体的分离鉴定34-44
• 引言34
• 1 材料与方法34-38
• 1.1 材料34-35
• 1.1.1 样品来源34
• 1.1.2 主要试剂34
• 1.1.3 仪器与设备34-35
• 1.2 方法35-38
• 1.2.1 溶液的配制35
• 1.2.2 培养基的配制35
• 1.2.3 病料处理及分离培养35-36
• 1.2.4 纯化36
• 1.2.5 染色镜检36
• 1.2.6 PCR鉴定36-37
• 1.2.7 基因测序鉴定37-38
• 2 结果与分析38-42
• 2.1 液体培养基培养结果38
• 2.2 固体培养基培养结果38-39
• 2.3 染色镜检结果39-40
• 2.4 PCR鉴定和基因测序鉴定结果40-42
• 3 结论与讨论42-44
• 3.1 结论42
• 3.2 讨论42-44
• 附录44-45
• 参考文献45-51
• 英文缩略词表51-52
• 英文摘要52-53

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本文编号：869805