雏鸭感染坦布苏病毒后部分免疫指标的动态变化

发布时间：2017-09-22 14:27

  本文关键词：雏鸭感染坦布苏病毒后部分免疫指标的动态变化

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【摘要】：鸭坦布苏病毒病(Duck Tembusu virus,DTMUV)是我国2010年新发生的一种传染性疾病,该病以雏鸭瘫痪、种鸭产蛋率下降为主要特征,给我国养鸭业造成了严重的经济损失。最初该病被命名为鸭出血性卵巢炎(duck hemorrhagic ovaritis,DHO),但其后的研究表明DTMUV是一种黄病毒。目前,几乎所有种类的鸭均可感染DTMUV,该病的典型临床症状表现为食欲减退,腹泻,生长迟缓,共济失调,产蛋率下降等(Cao et al.,2011a);剖检可见发病鸭卵巢出血、肝脏肿大、变性坏死,心内膜、心外膜出血,脾脏坏死,肠道出血等。不同日龄的鸭对DTMUV的易感性不同,雏鸭和产蛋鸭最易感,育成鸭有一定的抵抗力。孙晓艳等对不同日龄樱桃谷雏鸭对DTMUV易感性进行了研究,结果显示,雏鸭对DTMUV的易感性与感染日龄相关:日龄越小越容易受到感染,临床症状和病理变化也更加严重。为研究DTMUV对雏鸭免疫的影响,本研究对不同日龄的雏鸭感染DTMUV后血液中免疫球蛋白和相关细胞因子的动态变化进行了研究和比较,并选取其中一个日龄的雏鸭-5日龄雏鸭,对其感染DTMUV后免疫器官的动态病理学变化和细胞凋亡情况进行了系统研究。本研究分别对5日龄、10日龄和25日龄雏鸭静脉接种DTMUV,并于接种后不同时间对雏鸭血清中的免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-?进行检测。结果显示,不同日龄雏鸭接种DTMUV后,血清中3种免疫球蛋白含量均显著高于对照组(p?0.05),表明体液免疫在抗DTMUV的感染中发挥了主要作用。5日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-?含量均较低;10日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6水平均不同程度升高,但IFN-?含量仍低于对照组;25日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IFN-?含量在接种后一周内均显著高于对照组(p?0.05),IL-6含量则持续稳定在较高水平。综上所述,雏鸭接种DTMUV后细胞免疫受到了一定抑制,随着日龄的增长,DTMUV对雏鸭细胞免疫的抑制作用减弱,细胞免疫也逐渐在抗DTMUV的感染中发挥作用。在5日龄雏鸭接种TMUV后的不同时间取雏鸭脾脏、胸腺、法氏囊进行组织病理学、抗原和细胞凋亡检测。结果显示,感染雏鸭的脾脏、胸腺和法氏囊均严重受损。接种DTMUV后第4 d,脾脏淋巴细胞减少,胸腺可见严重的细胞崩解和大面积的坏死区域,法氏囊滤泡轻度萎缩;接种DTMUV后6 d免疫器官病变最为严重,其中胸腺静脉严重栓塞,淋巴细胞变性坏死,空泡化也更加严重;接种病毒后第8 d免疫器官病变均有所减轻,至第16 d,免疫器官结构基本恢复。在感染雏鸭的脾脏、胸腺、法氏囊中均检测到DTMUV抗原;细胞凋亡试验显示TMUV能够显著引起雏鸭脾淋巴细胞凋亡。综上所述,DTMUV可严重损伤雏鸭免疫器官,且这种损伤常发生于感染早期。
【关键词】：坦布苏病毒 雏鸭 细胞因子 动态病理学变化 细胞凋亡
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.32
【目录】：

• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 1 前言11-22
• 1.1 TMUV的分子生物学研究进展：11-13
• 1.1.1 TMUV单克隆抗体研究进展13
• 1.1.2 TMUV反向遗传学技术研究进展13
• 1.2 TMUV的流行病学13-15
• 1.3 TMUV感染的临床症状和病理组织学变化15-17
• 1.3.1 雏鸭感染TMUV的临床症状和病理变化15
• 1.3.2 育成鸭感染TMUV的临床症状和病理变化15-16
• 1.3.3 产蛋鸭感染TMUV的临床症状和病理变化16
• 1.3.4 TMUV对其他动物的致病性16-17
• 1.4 TMUV的检测方法17-19
• 1.4.1 PCR检测方法17
• 1.4.2 RT-LAMP检测方法17-18
• 1.4.3 ELISA检测方法18
• 1.4.4 胶体金免疫层析技术18-19
• 1.5 TMUV病毒的防治措施19-21
• 1.5.1 TMUV疫苗的研究进展19-20
• 1.5.2 TMUV治疗制剂的研究进展20-21
• 1.6 本研究的目的和意义21-22
• 2 材料与方法22-30
• 2.1 材料22-24
• 2.1.1 病毒与试验动物22
• 2.1.2 主要试剂及化学药品22
• 2.1.3 主要仪器22-23
• 2.1.4 主要试剂的配置23-24
• 2.2 方法24-30
• 2.2.1 病毒的增殖24
• 2.2.2 TMUV SDSG株ELD50测定24
• 2.2.3 试验方法24-29
• 2.2.4 数据处理29-30
• 3 结果30-41
• 3.1 不同日龄雏鸭感染坦鸭布苏病毒后血清中免疫球蛋白及细胞因子的动态变化30-33
• 3.1.1 不同日龄雏鸭感染DTMUV后免疫球蛋白含量的动态变化30-31
• 3.1.2 不同日龄雏鸭感染DTMUV后血清中IL-2，，IL-4 和IL-6 的动态变化检测31-33
• 3.2 鸭坦布苏病毒对雏鸭免疫系统的影响33-41
• 3.2.1 临床症状33
• 3.2.2 雏鸭体重和免疫器官指数的变化33-34
• 3.2.3 免疫器官病理学动态变化34-37
• 3.2.4 DTMUV抗原的检测37-38
• 3.2.5 TMUV对雏鸭脾细胞凋亡的影响38-41
• 4 讨论41-44
• 4.1 不同日龄雏鸭感染坦鸭布苏病毒后血清中免疫球蛋白及细胞因子的动态变化41-42
• 4.2 鸭坦布苏病毒对雏鸭免疫系统的影响42-43
• 4.3 TMUV对感染雏鸭脾细胞凋亡的影响43-44
• 5 结论44-45
• 参考文献45-55
• 致谢55-56
• 攻读硕士学位期间发表论文情况56

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