不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18表达量的影响

发布时间：2017-09-29 03:26

  本文关键词：不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18表达量的影响

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【摘要】：本试验旨在研究不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18(CK18)表达量的影响。采集42日龄山羊的瘤胃上皮组织,分别采用酶消化法和组织块法对其进行体外培养。通过光学显微镜观察原代培养和传代培养阶段的细胞形态,检测第5代山羊瘤胃上皮细胞的生长曲线,并采用细胞免疫荧光法对山羊瘤胃上皮细胞进行鉴定。结果显示:1)经0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸消化获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于2 d开始贴壁生长,5 d细胞开始明显增多,10 d细胞数量达到最大。2)经组织块法获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于4 d开始"爬出"组织块,8 d细胞开始明显增多,14 d细胞数量达到最大。3)经免疫荧光染色显示2种方法获得的细胞胞浆内CK18均呈阳性表达且细胞纯度后者明显高于前者。4)组织块法获得的细胞CK18表达量显著高于酶消化法(P0.05)。综合得出,与酶消化法相比,应用组织块法可成功获得纯度更高的山羊瘤胃上皮细胞。
【作者单位】： 中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室亚热带农业生态研究所湖南省农业生态过程重点实验室;湖南农业大学生物科学技术学院;
【关键词】： 山羊 瘤胃 上皮细胞 原代培养 分离 CK
【基金】：国家自然科学基金项目(31201826) 中央驻湘科研机构技术创新发展专项(2013TF3006)
【分类号】：S827
【正文快照】： 瘤胃是反刍动物消化代谢和营养物质吸收最重要的场所。瘤胃壁由黏膜、黏膜下层、肌层、浆膜4层构成。瘤胃上皮属于复层上皮,由黏膜向浆膜面分为4层:角质化细胞层、颗粒细胞层、棘状细胞层和基底层。瘤胃上皮有着重要的生理作用,如养分吸收与运输、挥发性脂肪酸代谢、对瘤胃壁

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本文编号：939739