猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立

发布时间：2017-10-02 07:20

  本文关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立

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【摘要】：针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N基因保守序列设计引物与TaqMan探针,在建立常规PCR的基础上,设计并优化了TaqMan荧光定量PCR方法用于PRRSV核酸的检测。应用新建立的荧光定量PCR方法检测其它主要猪病病原,无任何非特异性反应;针对PRRSV阳性克隆质粒的检测灵敏度可以达到1.2×101copy/ml,比常规PCR高100倍;通过对48份临床疑似样本的检测表明有29份样本为PRRSV阳性,与巢式PCR检测结果一致,而常规PCR只能检出其中19份阳性样本,灵敏度优于常规PCR方法。结果表明,试验建立的PRRSV TaqMan荧光定量PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为PRRSV临床诊断提供一个更为有效的方法。
【作者单位】： 浙江省畜牧兽医局;浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室;
【关键词】： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光定量PCR TaqMan探针 检测方法 定量检测 敏感性试验 特异性 保守序列 重组质粒 疫苗株
【基金】：浙江省科技厅项目(2005C22032)
【分类号】：S854.43;S858.28
【正文快照】： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是一种RNA病毒,可引起母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状。我国1996年首次报道分离到PRRSV[1],目前,该病毒已在我国很多省市猪群发生地方性流行,成为我国猪病的主要病原之一。PRRSV分为美洲

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