宫颈癌组织中miRNA-34c的表达水平分析及其靶基因PLK4的鉴定

发布时间：2018-01-25 14:39

  本文关键词： miRNA-c PLK 宫颈癌　出处：《中国肿瘤临床》2015年22期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的:分析miRNA-34c在宫颈癌组织中的表达水平并鉴定其新的靶基因。方法:利用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)检测甘肃省妇幼保健医院34例宫颈癌和癌旁正常组织中miRNA-34c表达水平。利用miRNA靶基因预测数据库预测miRNA-34c新的靶基因Polo样激酶4(PLK4)。将含有PLK4的3‘UTR片段荧光素酶载体分别与miRNA-34c模拟物或阴性对照共转染HEK293T细胞,并检测其荧光素酶活性。在人宫颈癌细胞Si Ha细胞中分别转染miRNA-34c模拟物或阴性对照,利用q RT-PCR法和Western blot法分别检测靶基因的m RNA和蛋白质的表达水平。结果:与癌旁正常组织相比,miRNA-34c在宫颈癌组织中表达下调。在HEK293T细胞中,miRNA-34c模拟物显著抑制荧光素酶的活性(P0.01)。miRNA-34c模拟物显著下调Si Ha细胞中PLK4的m RNA和蛋白质的表达(P0.01)。结论:miRNA-34c在人宫颈癌组织中表达下调,且能与PLK4的3’UTR结合并下调其m RNA和蛋白质的表达。
[Abstract]:Objective: to analyze the expression level of miRNA-34c in cervical carcinoma and identify its new target gene. Methods: Real-time quantitative PCR(q RT-PCR was used. The expression of miRNA-34c was detected in 34 cases of cervical cancer and adjacent normal tissues in Gansu Maternal and Child Health Care Hospital. The miRNA target gene prediction database was used to predict the new target gene of miRNA-34c. Polo like kinase 4 (. The luciferase vector containing PLK4 was cotransfected into HEK293T cells with miRNA-34c analogue or negative control. The luciferase activity was detected. MiRNA-34c mimics or negative controls were transfected into human cervical cancer cell line SIHA. The expression levels of m RNA and protein in target gene were detected by Q RT-PCR and Western blot methods respectively. Results: compared with normal tissues adjacent to cancer, the expression of m RNA and protein were detected by Q RT-PCR method and Western blot method respectively. The expression of miRNA-34c was down-regulated in cervical cancer tissues and in HEK293T cells. MiRNA-34c mimics significantly inhibited luciferase activity (P0.01). MiRNA-34c mimics significantly down-regulated the expression of m RNA and protein of PLK4 in SIHA cells (P0.01). Conclusion the expression of 10% miRNA-34c is down-regulated in human cervical carcinoma. And it could bind to PLK4 and down-regulate the expression of m RNA and protein.
【作者单位】： 甘肃省妇幼保健医院妇产科重症救护中心;
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一,其死亡率居女性恶性肿瘤的首位,其发病率呈升高和低龄化趋势[1-2]。micro RNA(mi RNA)是一种长度约为22个核苷酸的非编码单链小RNA,通常与靶基因m RNA完全或不完全匹配结合,诱导靶m RNA降解或阻遏其转录后翻译[3-4]。mi RNA-34家族包括mi RN

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2 朱明s，

本文编号：1463059