HOXD8基因在人卵巢癌细胞株SKOV3和SKOV3-DDP中的表达及卵巢癌顺铂耐药的机制研究

发布时间：2018-04-04 23:18

  本文选题：HOXD8　切入点：卵巢癌　出处：《福建医科大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的：检测同源异型盒基因D8(HOXD8)在人卵巢癌细胞株SKOV3和SKOV3-DDP中的表达，探讨卵巢癌顺铂耐药的机制。 方法：体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3及其配对顺铂耐药细胞株SKOV3-DDP，应用XTT比色实验检测SKOV3、SKOV3-DDP细胞株顺铂处理后的半数抑制浓度(IC50)，并计算耐药指数；半定量RT-PCR及实时荧光定量PCR、Elisa方法检测HOXD8在SKOV3、SKOV3-DDP细胞株中的表达，探讨同源异型盒基因D8与卵巢癌顺铂耐药的关系。 结果： 1.细胞经不同浓度顺铂处理72小时后，随着顺铂浓度的增加，细胞抑制率增高，显示出明显的剂量依赖关系；耐药细胞株经顺铂作用后，细胞抑制率明显低于敏感株细胞株(p0.05)。XTT比色实验结果显示，SKOV3细胞株顺铂IC50值为2.462±0.81ug/ml，SKOV3-DDP细胞株顺铂IC50值为9.174±0.24ug/ml，SKOV3-DDP细胞株的耐药指数为3.73，可进行耐药实验。 2.半定量RT-PCR实验结果显示，SKOV3细胞株中HOXD8mRNA的表达水平为0.238±0.037，SKOV3-DDP细胞株中HOXD8mRNA的表达水平为0.707±0.026。与SKOV3细胞株比较，SKOV3-DDP细胞株中HOXD8mRNA的相对表达量明显升高，差异有统计学意义(p0.05)。荧光定量PCR实验结果显示，SKOV3细胞株中HOXD8mRNA的表达水平为0.1711±0.026，SKOV3-DDP细胞株中HOXD8mRNA的表达水平为0.5761±0.037。与SKOV3细胞株比较，SKOV3-DDP细胞株中HOXD8mRNA的相对表达量明显升高，差异有统计学意义(p0.05)。 3. Elisa实验结果显示，SKOV3细胞株中HOXD8蛋白的表达水平为1584.4±2.08pg/ml， SKOV3-DDP细胞株中HOXD8蛋白的表达水平为4423.3±1.52pg/ml。与SKOV3细胞株比较，SKOV3-DDP细胞株中HOXD8蛋白的表达量明显升高，差异有统计学意义(p0.05)。 结论： HOXD8mRNA与HOXD8蛋白在体外培养的卵巢癌细胞株SKOV3及其顺铂耐药株SKOV3-DDP及中均有表达。 SKOV3-DDP细胞株中HOXD8的表达明显高于其在SKOV3细胞株中的表达，其表达的升高与卵巢癌细胞顺铂耐药存在明确的相关性。
[Abstract]:Aim: to detect the expression of homologous cassette gene D8 (HOXD8) in human ovarian cancer cell line SKOV3 and SKOV3-DDP, and to explore the mechanism of cisplatin resistance in ovarian cancer.Methods: human ovarian cancer cell line SKOV3 and its cisplatin resistant cell line SKOV3-DDP were cultured in vitro. The IC50 inhibition concentration (IC50) was measured by XTT colorimetric assay after treatment with cisplatin, and the drug resistance index was calculated.Semi-quantitative RT-PCR and real-time fluorescence quantitative PCR Elisa were used to detect the expression of HOXD8 in SKOV3- SKOV3-DDP cell line, and to explore the relationship between homologous cassette gene D8 and cisplatin resistance in ovarian cancer.Results:1.After treated with different concentrations of cisplatin for 72 hours, the cell inhibition rate increased with the increase of cisplatin concentration, which showed a significant dose-dependent relationship.缁嗚優鎶戝埗鐜囨槑鏄句綆浜庢晱鎰熸牚缁嗚優鏍，

本文编号：1712152