RNA干扰抑制EZH2基因表达对子宫内膜癌细胞上皮-间质转化的影响

发布时间：2018-08-05 20:05

【摘要】：目的:利用RNA干扰技术靶向沉默EZH2基因,检测其对子宫内膜癌细胞增殖、迁移能力及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:实时荧光定量PCR、Western blot检测EZH2在子宫内膜细胞ESC及子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2中的表达差异。利用化学技术合成小分子siRNA转染子宫内膜癌细胞,靶向抑制EZH2基因表达。CCK-8、Transwell小室检测干扰前后子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2增殖、迁移能力变化。Western blot检测干扰前后子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2中EMT相关蛋白E-cadherin、α-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达变化。结果:(1)EZH2在子宫内膜癌细胞株ECC-1、RL95-2中的表达明显高于子宫内膜细胞ESC(P0.01)。(2)RNA干扰抑制EZH2基因表达后,ECC-1、RL95-2细胞增殖、迁移能力降低(P0.01)。(3)RNA干扰抑制EZH2基因表达后,ECC-1、RL95-2细胞中上皮标志物E-cadherin和α-catenin的蛋白表达水平上调(P0.05),间质标志物N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平下调(P0.01)。结论:EZH2在子宫内膜癌细胞中高表达,siRNA靶向沉默EZH2基因可抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和上皮-间质转化。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of RNA interference targeting silencing EZH2 gene on the proliferation, migration ability and epithelial-mesenchymal transformation (EMT) of endometrial carcinoma cells. Methods: the expression of EZH2 in endometrial cell ESC and endometrial cancer cell line ECC-1 was detected by real-time quantitative PCR blot. Small molecule siRNA was synthesized and transfected into endometrial carcinoma cells by chemical technique, and the proliferation of endometrial cancer cell line ECC-1, RL95-2, was detected by inhibiting the expression of EZH2 gene. CCK-8 and Transwell chamber were used to detect the proliferation of endometrial cancer cell line ECC-1 and RL95-2 before and after interference. The expression of E-cadherin, 伪 -cateninin-N-cadherin and Vimentin in endometrial carcinoma cell line ECC-1rL95-2 before and after interference was detected by Western blot. Results: (1) the expression of EZH2 in the endometrial cancer cell line ECC-1 rL95-2 was significantly higher than that in the endometrial cell line ESC (P0.01). (2) RNA interference inhibited the proliferation of ECC-1 rL95-2 cells after EZH2 gene expression. Decreased migration ability (P0.01). (3) RNA interference inhibited the expression of E-cadherin and 伪 -catenin in ECC-1rL95-2 cells after EZH2 gene expression was inhibited (P0.05), and the expression levels of N-cadherin and Vimentin were down-regulated (P0.01). Conclusion the overexpression of EZH2 gene targeting by EZH2 in endometrial carcinoma cells can inhibit the proliferation, migration and epithelial-interstitial transformation of endometrial carcinoma cells.
【作者单位】： 上海交通大学附属第六人民医院妇产科;
【基金】：上海市科委基金资助项目(No:20134226)
【分类号】：R737.33

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本文编号：2166873