RNA干扰沉默MIF基因对宫颈癌SiHa细胞上皮细胞间质变的影响

发布时间：2018-11-10 10:41

【摘要】：[目的]探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对人宫颈癌SiHa细胞上皮间质转化(EMT)的影响。[方法]构建并鉴定重组真核表达质粒Genesil-MIF siRNA,转染人宫颈癌细胞SiHa细胞。RT-PCR检测各组细胞中MIF、E-cadherin、Vimentin mRNA表达水平。免疫细胞化学法组检测E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。[结果]重组质粒Genesil-MIF siRNA成功构建并转染至人宫颈癌SiHa细胞。RT-PCR法证实实验组细胞中E-cadherin mRNA相对高表达(P0.05),而Vimentin、MIF mRNA相对低表达(P0.05)。免疫细胞化学法证实实验组细胞中E-cadherin蛋白表达水平升高,Vimentin蛋白表达水平明显降低。[结论]MIF沉默通过促进SiHa细胞中E-cadherin表达,抑制Vimentin表达从而抑制EMT发生。
[Abstract]:[objective] to investigate the effect of macrophage migration inhibitory factor (MIF) on (EMT) transformation in human cervical cancer SiHa cells. [methods] Recombinant eukaryotic expression plasmid Genesil-MIF siRNA, was constructed and identified. RT-PCR was used to detect the expression of MIF,E-cadherin,Vimentin mRNA in human cervical cancer SiHa cells. The expression of E-cadherin-Vimentin protein was detected by immunocytochemistry. [results] Recombinant plasmid Genesil-MIF siRNA was successfully constructed and transfected into human cervical cancer SiHa cells. RT-PCR assay confirmed that the expression of E-cadherin mRNA was relatively high (P0.05), while the expression of Vimentin,MIF mRNA was relatively low (P0.05). Immunocytochemistry showed that the expression of E-cadherin protein increased and the expression of Vimentin protein decreased significantly in the experimental group. [conclusion] MIF silencing inhibits the occurrence of EMT by promoting the expression of E-cadherin and inhibiting the expression of Vimentin in SiHa cells.
【作者单位】： 山西医科大学;山西医学科学院山西大医院;
【基金】：山西省自然科学基金资助项目(2010011047-3) 山西省太原市科技兴市专项(0802053) 山西省科技攻关项目(20130313019-3)
【分类号】：R737.33

【共引文献】

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