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子宫内膜异位症间质细胞中miRNA-150的表达及其对CXCR4的影响

发布时间:2019-08-26 15:13
【摘要】:目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)间质细胞微小RNA-150(miRNA-150)的表达情况,并分析是否通过调控趋化因子受体4(CXCR4)的表达参与EMT的发生、发展。方法:选取2015年7月至2016年10月因EMT在天津市中心妇产科医院进行腹腔镜手术患者65例,因卵巢单纯囊肿行腹腔镜手术患者70例。留取EMT患者的宫腔内膜组织和病灶异位内膜组织及卵巢单纯囊肿患者宫腔内膜。消化组织培养内膜细胞,免疫荧光染色鉴定异位内膜间质细胞,实时荧光定量PCR(RTPCR)检测细胞中miRNA-150的相对表达量;内膜细胞用脂质体2000(lipofectamine2000)转染miRNA-150类似物(miRNA-150mimics)及抑制物(miRNA-150 inhibitor)。转染48小时后RT-PCR检测miRNA-150及CXCR4 mRNA相对表达量,并用流式细胞术检测CXCR4阳性细胞表达百分数。结果:miRNA-150在异位内膜细胞与在位内膜细胞内表达显著降低(P0.01)。转染miRNA-150mimics 48小时后RT-PCR结果提示CXCR4 mRNA表达增加(P0.01),流式细胞结果提示CXCR4阳性细胞百分比增加(P0.05);转染miRNA-150inhibitor后CXCR4mRNA低表达(P0.01),CXCR4阳性细胞百分比减少(P0.05)。结论:miRNA-150在EMT组织中低表达,并可能通过调控CXCR4的表达参与EMT的发生、发展。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of microRNA-150 (miRNA-150) in Leydig cells of (EMT) in Endometriosis and to analyze whether it is involved in the occurrence and development of EMT by regulating the expression of chemokine receptor 4 (CXCR4). Methods: from July 2015 to October 2016, 65 patients underwent laparoscopic surgery in Tianjin Central Obstetrics and Gynecology Hospital for EMT and 70 patients underwent laparoscopic surgery for simple ovarian cysts. The uterine intima and ectopic intima of patients with EMT and simple ovarian cysts were taken. The intimal cells were cultured in digestive tissue and identified by immunofluorescence staining. The relative expression of miRNA-150 in the cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCR (RTPCR). The intimal cells were transfected with liposomes 2000 (lipofectamine2000) into miRNA-150 analogues (miRNA-150mimics) and inhibitors (miRNA-150 inhibitor). The relative expression of miRNA-150 and CXCR4 mRNA was detected by RT-PCR 48 hours after transfection, and the percentage of CXCR4 positive cells was detected by flow cytometry. Results: the expression of miRNA-150 in ectopic intimal cells and eutopic intimal cells was significantly decreased (P 0.01). After 48 hours of miRNA-150mimics transfer, the expression of CXCR4mRNA increased (P01), the percentage of CXCR4 positive cells increased (P05), and the expression of CXCR4mRNA decreased (P01) and the percentage of CXCR4 positive cells decreased (P05) after miRNA-150inhibitor transfer. Conclusion: the expression of miRNA-150 is low in EMT, and it may be involved in the occurrence and development of EMT by regulating the expression of CXCR4.
【作者单位】: 天津医科大学研究生院;天津市中心妇产科医院;
【分类号】:R711.71

【参考文献】

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本文编号:2529393

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