雌激素受体-ERα、GPR30、孕激素受体在宫颈病变中的表达及其意义

发布时间：2020-04-18 08:49

【摘要】：【研究目的】宫颈癌在全球范围内是女性肿瘤中的高发疾病,尽管有广泛的筛查和先进的治疗手段,致死率有所降低,5年生存率有较大提高,但仍然存在较高的罹患率和病死率。早期发现宫颈癌并进行有效治疗,对提高患者生存率和生存质量有重要意义。宫颈癌发病原因未明,目前公认的是人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)持续感染是发生宫颈癌的重要原因。有研究提出HPV与雌激素协同作用可能促进宫颈上皮细胞恶性转化,雌激素和孕酮可能促进HPV DNA整合到宿主细胞基因组中,雌激素受体α(Estrogen Receptor alpha,ERα)表达下调是高危型HPV感染的宫颈病变进程中的一种早期改变。G蛋白偶联受体30(G-protein coupled receptor 30,GPR30)与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、转移、耐药等有关。有学者认为GPR30在宫颈癌组织中的表达提示患者预后良好。孕酮促进HPV DNA与ras致癌基因对宿主细胞致癌性转化作用,并增加E6和E7的表达,但有关性激素在宫颈癌病变中的作用研究较少,与HPV感染的关系知之甚少,还有待进一步研究。本课题为进一步研究雌激素受体与宫颈病变的关系,寻找宫颈癌的辅助治疗药物,检测雌激素受体家族ERα、GPR30及孕激素受体(Progesterone Receptor,PR)、核增殖指数Ki67、多肿瘤抑制基因p16在宫颈病变中的表达及其变化趋势,探讨性激素在宫颈病变中的作用。检测雌激素受体拮抗剂(Selective Estrogen Receptor Modulator,SERM)-Raloxifene对癌细胞生长的影响,寻找宫颈癌的辅助治疗或联合治疗药物,以改善肿瘤细胞的耐药性。【材料与方法】1.收集活检及手术切除标本的石蜡包埋组织60例,其中正常宫颈组织10例,低级别鳞状上皮内瘤变(LSIL)11例,高级别鳞状上皮内瘤变(HSIL)21例,宫颈鳞状细胞癌(SCC)18例。进行免疫组织化学(IHC)染色检测ERα、GPR30、PR、Ki67、p16在宫颈病变中的表达。2.选择宫颈鳞状细胞癌细胞株C33-A(HPV-)和Caski(HPV16+)进行细胞培养,给予雌激素受体拮抗剂Raloxifene药物,观察细胞生长情况,并收集细胞蛋白进行Western Blot定量检测ERα表达,评估Raloxifene对宫颈癌细胞生长的影响。【研究结果】1.石蜡包埋组织IHC检测结果:(1)ERα染色评分:正常宫颈组织平均分10.30,LSIL平均分9.09,HSIL平均分6.57,SCC平均分3.68,P0.001,组间差异有统计学意义。(2)GPR30染色评分:正常组GPR30平均分2.00,LSIL组平均分3.18,HSIL组平均分3.38,SCC组平均分3.63,P0.05,组间差异有统计学意义。(3)PR染色评分:正常组PR平均分3.00,LSIL组平均分2.45,HSIL组平均分3.00,SCC组平均分2.68,P0.05,组间差异无统计学意义。(4)Ki-67染色评分:正常组平均分1.40,LSIL组平均分2.27,HSIL组平均分3.10,SCC组平均分3.47,P0.001,组间差异有统计学意义。(5)P16染色评分:正常组平均分0.001,LSIL组平均分1.09,HSIL组平均分2.10,SCC组平均分2.61,P0.001,组间差异有统计学意义。2.细胞药敏实验结果:Raloxifene抑制细胞株C33A和Caski细胞内ERα蛋白表达,观察细胞生长受抑制,阴性对照组ERα蛋白灰度值与给药组比较,P0.05,差异有统计学意义。【结论】1.ERα表达与宫颈病变进程有关,正常宫颈组织和LSIL组织ERα高表达,随着宫颈病变进展ERα表达逐渐减少,宫颈癌及高级别病变ERα表达减少或缺失。2.GPR30与宫颈病变进程有关,正常宫颈组织和LSIL组织GPR30低表达或不表达,HSIL组织和SCC中GPR30过表达。3.PR表达与宫颈病变程度无明显关联性,不能作为判断宫颈病变程度的指标。4.Ki-67和p16与宫颈病变进程有关,正常宫颈组织不表达P16,Ki-67仅在宫颈基底细胞表达,随着宫颈病变进展Ki-67和P16表达逐渐增多或高表达。5.Raloxifene通过特异性阻断癌细胞内ERα受体表达,抑制宫颈癌细胞的增殖。综上所述,ERα、GPR30、Ki-67、p16在不同宫颈病变中的表达具有差异性,随着宫颈病变恶性级别的增高,GPR30、Ki-67、p16表达呈上升趋势;ERα表达程度与之相反,随着宫颈病变恶性程度的增高,ERα表达降低或缺失。Raloxifene可以特异性降低宫颈癌细胞中ERα蛋白表达水平,抑制细胞生长,期望能作为宫颈癌辅助治疗药物。
【图文】：

宫颈肿瘤,形成机制,雌激素受体α,调节转录因子

图 1：HPV 感染与宫颈肿瘤形成机制[15]雌激素能刺激女性生殖道正常上皮的生长和分化，其体调节转录因子雌激素受体α（ERα）而发挥作用的[，促进乳腺和子宫内膜肿瘤的发展，，这些肿瘤累计占[20]。ERα、ERβ、G 蛋白偶联受体 30（GPR30）同属又称 ESR 1）位于 6q25 染色体上，由八个外显子和 140,000 碱基[21-22]。ERα主要表达于垂体前叶、子宫

年龄分布,年龄分布,宫颈病变

收集大理大学第一附属医院病理科 2013 年-2017 年病理诊断为 LSIL、HSIL、SCC 病例共 927 例，其中 LSIL308 例、HSIL388 例、SCC178 例，将不同宫颈病变类型划分相同的年龄区间，进行流行病学统计，探讨相同年龄在不同宫颈病变中的发病率有无差异，每一病变的发病年龄高峰有无差异。表 1-1 不同宫颈病变年龄分布情况病变年龄LSIL HSIL SCC 合计≤30 42（13.60%) 27（7%） 4（2.25%） 7331-40 86（27.9%） 101（26%） 23（12.92%） 21041-50 126（40.90%） 165（42.50%） 64（35.96%） 35551-60 45（14.60%） 65（16.80%） 51（28.65%） 161≥61 9（2.90%） 30（7.70%） 36（20.22%） 75合计 308 388 178 874
【学位授予单位】：大理大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33

【参考文献】