SIRT3表达降低导致滋养细胞凋亡增加在子痫前期发病中的作用

发布时间：2020-05-16 12:00

【摘要】：目的:研究去乙酰化酶3(Sirtuin 3,Sirt3)在正常妊娠(Normal control,NC)与子痫前期(Pre-eclampsia,PE)胎盘组织中的表达水平,以及它对滋养细胞凋亡功能的影响,探讨其影响是否和子痫前期的发病相关。方法:收集重庆医科大学附属第一医院产科剖宫产分娩的子痫前期和正常妊娠的胎盘组织样本各12列,收集时间为2016年09月至2017年03月。应用免疫荧光(Immunofluorescence,IF)及蛋白质印迹(Western blot,WB)检测正常妊娠和子痫前期孕妇胎盘组织中Sirt3蛋白的表达。再使用慢病毒(Lentivirus,LV)敲低早孕人绒毛外滋养细胞株(HTR8/SVneo Cell Line)的Sirt3。ATP试剂盒检测HTR8/SVneo细胞的ATP产生情况,了解线粒体产能状态;然后通过流式细胞技术(FCM)及CCK-8实验等检测HTR8/SVneo细胞的凋亡情况;WB检测active capase-3、IL-1β、MMP2等蛋白的表达水平。结果:与正常妊娠胎盘组织比较,Sirt3在子痫前期胎盘组织中的表达明显降低,敲低Sirt3后HTR8/SVneo细胞的ATP产生减少,线粒体产能障碍,促使滋养细胞凋亡和炎症因子明显增加,以及和侵袭相关的蛋白表达下调。结论:Sirt3表达降低导致滋养细胞凋亡增加,可能在子痫前期的发病中起到一定的作用。
【图文】：

14 PE 组中 Sirt3 的荧光相对表达量(n=3，**p=0orescence of Sirt3 in NC and PE group(n=3，** 1. Sirt3 在胎盘组织中的荧光表达情况(a.b) 1. Fluorescence expression of Sirt3 in placenta (

图 3. Sirt3 在 HTR8/SVneo 细胞中的表达情况（n=3，**p＜0.0001） 3. Expression of Sirt3 in Vehicle group and LV-Sirt3 group（n=3，**p＜0.0001）表 2.Vehicle 组和 LV-Sirt3 组中 Sirt3 的平均吸光度值（x±s）Table 2 .Mean absorbance of Sirt3 in Vehicle and LV-Sirt3 group(x±s)Sirt3 表达水平 组 1.238 ± 0.022633 组 0.09169±0.0206037.45＜0.0001R8/SVneo 细胞 的 ATP 生成情况显示，敲低 Sirt3 后，HTR8/SVneo 细胞线粒体的产能能力受损，，ATP差异具有统计学意义（n=3，t=3.482，p=0.0253），如图 4，表 3 所示：
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R714.244

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本文编号：2666706