囊胚期和卵裂球期胚胎移植对子代远期生长发育和内分泌的影响

发布时间：2020-06-07 22:11

【摘要】：研究背景:人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)是帮助不孕不育患者成功受孕的有效治疗手段,主要包括人工授精(artificialinsemination,AI)和体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)及其衍生技术。后者还进一步分为体外受精(in vitro fertilization,IVF)、卵细胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)以及胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)。IVF-ET的基本过程是将精子和卵细胞从体内取出,经过体外受精以及随后的胚胎培养,最终将胚胎移植入宫腔内。既往临床多选择卵裂球期胚胎移植,但随着囊胚培养技术的进步,囊胚培养成功率逐步提高,选择性单囊胚移植应用率近年来大幅提升。其优势在于一方面对发育潜能较差的胚胎进行了自然选择,着床率较高,另一方面减少了胚胎移植数目,缩短了胚胎在宫内停滞的时间,一定程度上减少了多胎妊娠、异位妊娠等并发症风险。但囊胚培养延长了胚胎的体外培养时间,即增加了胚胎的体外暴露。体外培养过程虽强调模拟体内环境,但由于体内环境的复杂性,目前仍可能有许多因素是体外无法模拟的。从生殖细胞发生至胚胎着床的整个阶段属于围受孕期(periconceptionalperiod),是生命早期发育极其重要的阶段。该时期胚胎细胞数量相对较少,立体结构简单,可充分暴露于所处环境中。且胚胎细胞具备多能性或全能性,发育潜能高,任何微小的变异都可能在后续的发育过程中级联放大,这些改变既可能使得胚胎在适应环境的过程中受益,也可能产生不利的远期影响。健康和疾病的发育起源学说(developmental origins ofhealth and disease,DOHaD)提出成年期疾病与生命早期发育相关,生命起源时期的改变可体现在一生中的任何阶段,并最终改变个体发育进程和结局。目前,关于卵裂球期和囊胚期胚胎移植对子代影响的相关研究多集中在近期结局,且纳入的研究对象可能受新鲜和冷冻周期的混杂影响,对于子代的远期发育和内分泌改变并无相关研究。研究目的:本研究旨在比较新鲜周期体外受精后移植卵裂球期及囊胚期胚胎对子代远期生长发育以及内分泌情况的影响。材料与方法:基于山东大学附属生殖医院前瞻性辅助生殖子代出生队列,选择2014年8月至2018年4月期间行体外受精胚胎移植后成功受孕并活产单胎患者的子代生成子队列。纳入标准包括:①新鲜周期胚胎移植;②单胎活产;③月龄不超过36个月;④母亲分娩年龄不超过43岁。排除标准包括:①冻融卵子体外受精;②供卵体外受精;③子代存在出生缺陷、染色体疾病等先天异常。收集受试子代的亲代信息作为基线信息,包括:亲代双方出生日期、受精类型、身高、体重;母亲双侧卵巢窦卵泡计数(antral follicle count,AFC)、基础生殖内分泌指标(FSH、LH、E2、P、PRL、T)、抗苗勒管激素(AMH)、甲状腺功能指标(FT3、FT4、TSH)。对进入子队列的受试子代进行纵向随访,共计随访1850次,其中囊胚移植组(D5-ET组)共随访389次,卵裂球期移植组(D3-ET组)1461次。每次随访测量及计算其身长、体重、头围、体重-身长比(weight/length ratio,WLR)、体重指数(body mass index,BMI)、三次方体重指数(tri-ponderal mass index,TMI)。比较两组上述指标的差异,并利用以下方法对混杂因素进行较正,包括根据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)标准计算子代身长(两岁以上子代使用身高计算,身高=测得身长-0.7cm)、体重、BMI、头围对应的z分数,以去除月龄、性别的混杂影响;使用广义估计方程(generalized estimating equation,GEE)进行统计分析以去除重复随访的影响;针对受精方式和子代出生胎龄进行亚组分析,以去除受精方式和出生胎龄差异的混杂影响。同时我们也根据月龄分层,通过WLR、BMI、TMI三种指标细化评估子代生长代谢状态。此外,我们采集子队列中24-36月龄的受试子代外周血样本进行甲状腺功能指标(FT3、FT4、TSH)和生殖内分泌指标(FSH、LH、E2、PRL、T)检测。由于上述月龄组样本量较少,又进一步招募该亚组独立样本,扩大样本量至60例进行验证。我们采用酶联免疫法定量检测母亲的血清AMH,电化学发光法定量分析母亲和子代外周血样本的甲状腺功能及生殖内分泌指标。统计学处理选用IBM SPSS 25.0软件。检验水准取α =0.05。研究结果:D5-ET组与D3-ET组0-36月龄子代身长(或身高)、体重、头围、BMI均无显著差异。根据受精方式分为IVF和ICSI亚组,在各亚组内上述指标仍无显著差异。根据出生胎龄分为早产和足月产亚组,足月产亚组各指标两组间无显著差异,但早产子代中D5-ET组较D3-ET组体重z分数(1.28±1.04 vs.0.45±1.11,P0.05)及BMI z分数(1.42±1.22 vs.0.60±1.29,P0.01)有显著升高,考虑可能与早产子代样本量较小有关。D5-ET组TMI值仅在7-12月龄段(26.57 vs 26.08 kg/m3,P0.05)和 13-18月龄段(23.48 vs 22.77 kg/m3,P0.05)较D3-ET组有短暂性增高,但各月龄段两组间WLR和BMI均无显著差异。对24-36月龄子代内分泌指标进行比较,两组间FSH、LH、E2、PRL、T、TSH、FT3、FT4无明显差异,扩大样本验证后仍无差异。研究结论:囊胚移植或卵裂球期移植并不影响0-36月龄子代生长发育以及内分泌状态,但仍需更大样本量和更远期随访的研究支持。
【图文】：

将身长（或身高）、体重、头围、ＢＭＩ的数据标准化。计标准化ｚ分数＝（个体测量值－该个体所属性别月龄段均值）／该另外，因本研究对子代进行了多次随访，获得的数据为重复用广义估计方程（ＧＥＥ）比较Ｄ５－ＥＴ组与Ｄ３－ＥＴ组子代身高（或围以及ＢＭＩ邋ｚ分数，，发现两组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。逡逑表３囊胚移植组（Ｄ５－ＥＴ）和卵裂球期移植组（Ｄ３－ＥＴ）子代身高（或身长）ｚＢＭＩ邋ｚ分数以及头围ｚ分数的比较（ｘ士ｓ邋）逡逑￣逦襄胚移植组逦卵裂球期移植样本量逦３８９逦１４６１逡逑身高（或身长）ｚ邋分数逦０．２８±１．０５逦０．３６±１．１９体重邋ｚ邋分数逦０．８７±１．１０逦０．８３土邋１．２５ＢＭＩ邋ｚ邋分数逦０．９５±１．１８逦０．８２±１＿４１头围邋ｚ邋分数逦０．０１邋±０．９３逦０．０３±１．２４备注：Ｐ值为使用广义估计方程（ＧＥＥ）计算获得逡逑１＇５＂

图２邋ＩＶＦ亚组中囊胚移植组（Ｄ５－ＥＴ）和卵裂球期移植组（Ｄ３－ＥＴ）子代身高（或身长）Ｚ体重ｚ分数，ＢＭＩ邋ｚ分数以及头围ｚ分数的比较逡逑ＩＣＳＩ邋ｓｕｂｇｒｏｕｐ邋ａｎａｌｙｓｉｓ逡逑１＇５＇逦ｐ＝０．８３逦ｍ邋Ｄ５－ＥＴ逡逑１邋0．逦Ｐ＝0－５７逦ｊ逦ｍ逦Ｄ３－ＥＴ逡逑Ｉ邋°邋－邋ｊ邋Ｉ邋ｒ：逡逑－０．５邋ｉ逦ｉ逦ｉ逦ｉ逡逑？／逦／逡逑
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R714.8

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本文编号：2702070