靶向LETMD1的miR-494在宫颈癌中的作用研究

发布时间：2020-06-22 04:55

【摘要】：目的:宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一。近年来,由于人们现代生活结构及环境的改变等诸多因素,宫颈癌发病率表现出逐年上升趋势。LETMD1又名人宫颈癌基因(HCCR),大量研究表明LETMD1与多种肿瘤的发生发展相关,在肿瘤标志物方面也扮演着重要角色,其作为一个癌基因被证实在宫颈癌及宫颈癌细胞系中均有过度表达,但具体调控机制尚未明确。MicroRNA(miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的小型非编码RNA,其广泛存在于真核生物中,并在多种生理病理过程中发挥着不可忽视的作用。MiR-494在人视网膜母细胞瘤中被首次发现,目前越来越多的研究发现miR-494广泛参与多种恶性肿瘤的发生发展过程,关于miR-494对宫颈癌发生发展的影响虽已有少量研究报道,但其潜在机制仍需要进一步探索研究。本研究利用生物信息学分析、RT-qPCR、Western blot、双荧光素酶实验及细胞功能实验等,探讨靶向于LETMD1的miR-494在宫颈癌发病机制中的作用。方法:1、首先我们利用RT-qPCR和Western-blot检测30例宫颈癌组织及30例正常宫颈组织中miR-494和LETMD1的含量,分析二者之间的相关性及其与宫颈癌患者临床病理特征的关系;2、将HeLa细胞分别转染miR-494 mimics和miR-494 inhibitor及其各自阴性对照,并检测转染细胞中miR-494与LETMD1的表达情况;3、利用生物信息学技术预测miR-494与LETMD1的靶向关系,并进一步通过双荧光素酶报告基因实验证实两者间的靶向性调控;4、细胞克隆形成实验检测过表达及降表达miR-494对HeLa细胞增殖的影响;Transwell实验检测过表达及降表达miR-494对HeLa细胞迁移和侵袭的影响。所有数据均采用SPSS 20.0统计软件进行单因素方差分析(ANOVA),以P0.05表示差异具有统计学意义。结果:1.与正常宫颈组织相比,miR-494在宫颈癌组织中表达明显降低。LETMD1在宫颈癌组织中表达明显升高,两者表达呈明显负相关(P0.05),且miR-494的含量与肿瘤患者FIGO分期呈明显负相关(P0.05)。2.对比转染mimics NC,转染miRNA-494 mimics时LETMD1mRNA及蛋白水平明显下降(P0.05);对比转染inhibitor NC,转染miRNA-494 inhibitor时LETMD1 mRNA及蛋白水平明显升高(P0.05)。3.生物信息学预测LETMD1为miR-494的靶基因,双荧光素酶报告基因实验进一步证实miR-494直接作用于LETMD1 mRNA的3’UTR。4.细胞克隆形成试验结果显示过表达miR-494可抑制HeLa细胞的增殖(P0.05),Transwell实验证实过表达miR-494可抑制HeLa细胞的迁移和侵袭(P0.05)。结论:宫颈癌患者中,miR-494表达与患者FIGO分期明显相关,miR-494可能通过靶向作用LETMD1进而抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭。
【学位授予单位】：承德医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.33

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 周美英;王友硕;黄维;;胰岛素样生长因子-2在不同期别宫颈癌中的表达及意义[J];中国妇幼保健;2018年13期

2 杨金龙;;免疫组化技术在宫颈癌诊断中的临床运用[J];人人健康;2017年04期

3 李文瑞;武贵臻;郭君;维尼热;李萍;王月珠;徐英;;已婚妇女宫颈组织乳酸脱氢酶(LDH)及其同工酶谱的观察[J];新疆医学院学报;1987年02期

4 满延高;陈敏诲;胡丽萍;雷森林;陈红斌;;小鼠宫颈活及灭活HSV-2感染时局部组织与脱落细胞的形态学特征[J];病毒学杂志;1987年02期

5 陈瑞娣;;宫颈癌的化学预防(维生素A类化合物)[J];肿瘤防治研究;1987年04期

6 李经莲;李德炎;;子宫颈癌病因学配对调查报告[J];中国初级卫生保健;1988年11期

7 周美惠;陆树贤;沈铭昌;曾X;虞震芬;;激光激发组织固有荧光诊断技术在宫颈防癌检查中的应用[J];应用激光;1988年04期

8 傅采萍;冷冻治疗宫颈疾患1537例疗效观察[J];实用妇科与产科杂志;1989年02期

9 孟祥金;孙瑜;刘知慧;陈敏诲;李新志;张有新;李昆;韩日才;司静一;张卫;曾维坤;胡伦颖;农树桧;;宫颈疾患中人乳头瘤病毒和疱疹病毒Ⅱ型DNA的检测[J];病毒学杂志;1989年01期

10 Henry RJW;王洋;;应用免疫组织化学方法对正常、间变和恶性的宫颈组织细胞浆内雌三醇受体的研究[J];国外医学.妇产科学分册;1989年04期

相关会议论文 前7条

1 阮正英;;骨膜蛋白在宫颈癌发病机制中的作用[A];2016年浙江省医学会病理学术年会论文汇编[C];2016年

2 杨敏;;经阴道超声E-Cervix宫颈弹性成像技术评价正常及早孕期宫颈组织[A];中国超声医学工程学会第十届全国超声治疗及生物效应医学学术大会论文汇编[C];2019年

3 唐振华;李柱南;黄勇;王进进;胡伟平;;实时PCR检测宫颈组织脆性组氨酸三联体(FHIT)基因表达[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年

4 李伟;王传新;;HPV16 E7与经典HLA-Ⅰ类分子在宫颈癌中表达的关系研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会-2011年学术交流会论文汇编[C];2011年

5 赵霞;林晓冰;齐彩霞;秦加慧;;光动力疗法联合保妇康栓治疗宫颈人乳头瘤病毒感染106例临床疗效分析[A];2016全国中西医结合妇产科研究进展学术研讨会暨2016年第一届江浙沪中西医结合妇产科高峰论坛论文及摘要集[C];2016年

6 张立冬;谢威;裴静;赵旦;;宫颈细胞学筛查及高危型HPV检测与宫颈组织学[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科肿瘤会场（妇科肿瘤学组、妇科病理学组）论文汇编[C];2012年

7 程娇影;崔满华;;层粘连蛋白与宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌关系的研究[A];中华医学会第五次全国围产医学学术会议论文汇编[C];2005年

相关重要报纸文章 前1条

1 郭宏伟;过早同房 为“癌”开路[N];保健时报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 张红艳;TGFBR2基因在宫颈癌中的表达与作用研究[D];武汉大学;2015年

2 陈炎;TGF-β信号中R-Smads磷酸酶在宫颈癌发生发展过程中的表达及作用机制研究[D];安徽医科大学;2018年

3 张腾;TNFR2~+Treg亚群和TNFR2及相关细胞因子在宫颈癌中的作用及机制研究[D];山东大学;2018年

4 王翔宇;S100A14在宫颈癌上皮间质转化过程中的作用及其分子机制的研究[D];青岛大学;2016年

5 宋蓉蓉;microRNA-195通过靶基因HDGF抑制宫颈癌的肿瘤行为研究[D];安徽医科大学;2016年

6 王碧;长链非编码RNA UCA1在宫颈癌顺铂耐药中的作用研究[D];贵州医科大学;2017年

7 刘军;MAL-光动力治疗宫颈癌的机制研究[D];南方医科大学;2012年

8 程腾;XPNPEP2促进宫颈癌的侵袭与转移的机制研究[D];华中科技大学;2017年

9 施丹;lncRNA NONHSAT096867通过IL-8和Bax调控辐射诱导的宫颈癌Siha细胞发生凋亡的机制研究[D];吉林大学;2018年

10 孙清;雌激素受体ER-α36对宫颈癌生物学行为的影响及机制研究[D];山东大学;2018年

相关硕士学位论文 前10条

1 李新;靶向LETMD1的miR-494在宫颈癌中的作用研究[D];承德医学院;2019年

2 王鲜;宫颈癌根治性同步放化疗患者预后的相关研究[D];吉首大学;2019年

3 宋苗苗;~(18)F-FDG PET/CT在ⅠA2-ⅡA2期宫颈癌诊断中的临床价值[D];中国医科大学;2019年

4 冯延平;河南省平顶山市宫颈上皮内瘤变、宫颈癌与人乳头瘤病毒感染亚型关系分析[D];新乡医学院;2019年

5 葛美玲;Wnt-1、β-catenin 、Lgr5在宫颈癌中的表达及意义[D];青岛大学;2019年

6 刘颖;LRP5在宫颈癌发病中的作用机制研究[D];河南大学;2019年

7 周艳芬;WASF3在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达及意义[D];南昌大学;2019年

8 全菲斐;PD-1、PD-L1在宫颈癌中的表达及临床意义[D];南华大学;2019年

9 赵宏艳;Ⅰb-Ⅱa期宫颈癌患者术后五年生存率及预后的影响因素分析[D];河北北方学院;2019年

10 张梦;miR-135a-5p、GATA3、STAT3在宫颈癌中的表达及其相关性研究[D];华北理工大学;2019年

本文编号：2725224