低氧环境下HLA-G对滋养细胞生物学行为的影响

发布时间：2020-10-23 09:20

　　 目的:观察低氧处理后JEG-3细胞中HLA-G的m RNA和蛋白水平表达情况及JEG-3细胞的生物学行为;并在体外下调JEG-3细胞中HLA-G表达后,观察低氧对JEG-3细胞生物学行为的影响;探讨HLA-G参与低氧条件下妊娠期高血压疾病发生的分子机制。方法:(1)用q PCR及Western Blot法检测低氧处理不同时间后(H12h、H24h、H48h、H72h)JEG-3细胞中HLA-G的m RNA及蛋白水平的表达。(2)利用si RNA技术体外下调JEG-3细胞中HLA-G表达,检测低氧处理后JEG-3细胞中HLA-G的m RNA及蛋白水平表达。(3)MTT法及Transwell法检测各组细胞增殖活性和侵袭能力。结果:(1)低氧处理48h和72h后,JEG-3细胞中HLA-G的mRNA及蛋白表达水平较常氧对照组下降,且低氧72h后下降更为明显,差异均有统计学意义(P0.05);与常氧对照组相比,JEG-3细胞经低氧处理后生长缓慢;MTT结果显示,低氧12和24h后,细胞增殖活性无明显改变,而低氧48h及72h后细胞增殖活性降低,差异有统计学意义(P0.05);Transwell实验结果显示,与常氧对照组相比,低氧12、24和48h后,细胞侵袭能力无明显改变,而72h后细胞侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P0.05)。(2)在常氧和低氧下,JEG-3细胞中下调HLA-G的表达后,与阴性对照组相比,转染组细胞中HLA-G的m RNA及蛋白表达水平均明显降低,与常氧转染组相比,低氧转染组中HLA-G的m RNA及蛋白表达水平也降低,差异有统计学意义(P0.05);且与阴性对照组相比,转染组细胞增殖及侵袭能力均下降,差异有统计学意义(P0.05);与常氧转染组相比,低氧转染组细胞中细胞增殖及侵袭能力同样下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论:(1)JEG-3细胞经低氧处理后增殖活性及侵袭能力下降可能与细胞中HLA-G表达下降有关。(2)低氧环境下HLA-G表达下降可能通过影响滋养细胞增殖活性及侵袭能力参与妊娠期高血压疾病发生。
【学位单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R714.2
【部分图文】：

12图 3.1 HLA-G 的溶解曲线图h、H24h、H48h、H72h 组 JEG-3 细胞中 HLA-GmRNA果显示H12h组与H24h组细胞中HLA-G mRNA表达），低氧处理48h及72h后细胞中HLA-G 的mRNA.05），H72h组较C组HLA-G的 mRNA水平显著下

图3.2 低氧处理不同时间后JEG-3细胞中HLA-G的蛋白表达注：A.Western blot检测常氧及低氧条件下JEG-3细胞HLA-G蛋白表达的原始条带；B.蛋白条带的分析结果；*表示与C组比较差异有统计学意义（P＜0.05），#表示与C组比较P＜0.01。3.2.2 细胞经 siRNA 转染后 HLA-G 蛋白相对表达量Si1、Si2、Si3片段转染JEG-3细胞后HLA-G蛋白表达较Blank control组均下降（P<0.05）（如图3.3），表达抑制率分别为（39.037±0.2625）％、（61.814±2.214）％、（60.847±1.798）％。Si2片段抑制HLA-G在蛋白水平表达效果最好，与qPCR结果一致，后续实验用Si2片段进行转染。

15图3.2 低氧处理不同时间后JEG-3细胞中HLA-G的蛋白表达注：A.Western blot检测常氧及低氧条件下JEG-3细胞HLA-G蛋白表达的原始条带；B.蛋白条带的分析结果；*表示与C组比较差异有统计学意义（P＜0.05），#表示与C组比较P＜0.01。3.2.2 细胞经 siRNA 转染后 HLA-G 蛋白相对表达量Si1、Si2、Si3片段转染JEG-3细胞后HLA-G蛋白表达较Blank control组均下降（P<0.05）（如图3.3），表达抑制率分别为（39.037±0.2625）％、（61.814±2.214）％、（60.847±1.798）％。Si2片段抑制HLA-G在蛋白水平表达效果最好，与qPCR结果一致，后续实验用Si2片段进行转染。图3.3 Western blot检测siRNA转染JEG-3细胞后HLA-G蛋白表
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李明红;高钰琪;袁志兵;孟民杰;;白藜芦醇对低氧内皮细胞活性的影响及机制研究[J];时珍国医国药;2016年06期

2 闫琳;王龙梅;杨侠;董晓光;徐海峰;;低氧对小鼠视网膜神经节细胞-5中根蛋白表达的影响[J];眼科新进展;2014年05期

3 尉晓娜;谢于鹏;夏誉;何金彩;;低氧对小鼠旷场行为的影响[J];温州医学院学报;2012年01期

4 刘海霞;李道季;高磊;王伟伟;陈炜清;;长江口夏季低氧区形成及加剧的成因分析[J];海洋科学进展;2012年02期

5 王茹;;低氧运动/训练研究新动向[J];北京体育大学学报;2012年08期

6 孙衍伟;曾琴琴;侯仕彩;丁兆军;周嘉云;安永恒;孟令新;;高-低氧放疗与低氧放疗对食管癌疗效的对比研究[J];中华全科医学;2011年10期

7 周燚;李良鸣;方彩华;;低氧适应对糖代谢的影响及其机制[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年24期

8 翁锡全;林文弢;黄丽英;徐国琴;余群;;低氧健身原理及其应用探讨[J];中国体育科技;2006年05期

9 周兆年;低氧与健康研究[J];中国基础科学;2003年05期

10 甄国华 ,王小珍;低氧时—氧化碳对PASMC增殖的影响及机制探讨[J];高原医学杂志;2002年04期

相关博士学位论文 前10条

1 彭清臻;间断低氧增加心房神经活性和局灶性房颤诱导性：自主神经的重要作用[D];武汉大学;2014年

2 朱海峰;间歇性低氧对抗心肌缺血复灌损伤的钠、钙离子调控[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2003年

3 毛杉杉;低氧、训练对大鼠骨骼肌毛细血管新生的影响及HIF-1和VEGF在其中的作用机制研究[D];北京体育大学;2004年

4 潘同斌;低氧、运动对大鼠骨骼肌蛋白代谢及肌球蛋白重链（MHC）亚型基因表达的影响[D];北京体育大学;2004年

5 冯学威;实验性间断低氧大鼠和阻塞性睡眠呼吸暂停患者下丘脑—垂体—肾上腺轴和生长激素轴的调节[D];中国医科大学;2005年

6 刘春凤;低氧参与UUO大鼠肾损伤的作用机制及干预的实验研究[D];复旦大学;2005年

7 李海生;低氧促进人骨髓间充质干细胞增殖和分化及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

8 张家兴;模拟高原间歇性低氧对小鼠学习记忆功能的影响[D];浙江大学;2005年

9 周敏;低氧感应、信息传递与钾离子通道在低氧性肺血管收缩中的作用[D];四川大学;2005年

10 余斌;低氧及运动对骨骼肌中低氧诱导因子影响的实验研究[D];第一军医大学;2005年

相关硕士学位论文 前10条

1 任倩妍;低氧诱导大弹涂鱼低氧生理应激及葛根素和姜黄素的缓释作用研究[D];浙江海洋大学;2018年

2 曲新霞;低氧环境下HLA-G对滋养细胞生物学行为的影响[D];青海大学;2018年

3 李晓娜;盐酸川芎嗪对低压低氧大鼠认知功能及GABAR表达的影响[D];青海大学;2018年

4 彭源;M_3受体在低氧引起的H9c2大鼠心肌细胞损伤中的作用及机制的研究[D];青海大学;2018年

5 黄贵婷;低氧对水牛脂肪干细胞增殖和多能性维持的影响[D];广西大学;2017年

6 曹义;丹参酮ⅡA磺酸钠通过SIRT1-FOXO3a通路改善低氧性肺动脉高压[D];河北医科大学;2017年

7 程科;低氧对人微血管内皮细胞HIF-1α表达及生物学行为的影响[D];重庆医科大学;2017年

8 范忠伟;低氧预培养脂肪间充质干细胞复合小肠粘膜下层构建组织工程肌腱修复大鼠跟腱缺损的实验研究[D];西南医科大学;2017年

9 李丹;低氧微环境对脂肪间充质干细胞成肌腱分化影响的研究[D];西南医科大学;2017年

10 郑王山;藏族人群中低氧适应相关基因EP300的变异模式及其对高原低氧环境适应的遗传贡献[D];甘肃农业大学;2017年

本文编号：2852845