TRAIL对滋养细胞的功能及侵袭调控机制的研究

发布时间：2020-12-21 17:24

　　目的:1)研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）对滋养细胞的侵袭、增殖及诱导细胞凋亡能力的影响;2)探讨TRAIL调控滋养细胞侵袭的可能机制。方法:1)利用Transwell小室Matrigel侵袭实验检测不同浓度（0 ng/ml、0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml）及作用时间（24h、48h、72h）的 rsTRAIL 对HTR-8/SVneo细胞侵袭能力的影响;2)利用CCK8比色法、AnnexinV-EGFP/PI双染法分别检测不同rsTRAIL浓度对HTR-8/SVneo细胞增殖及凋亡的影响;3)利用 qPCR 及 Western blotting 分别检测经不同浓度（0 ng/ml、0.1 ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml）rsTRAIL 处理的 HTR-8/SVneo 细胞内 CXCR4、EGFR、MMP2 和miR-146a表达的变化。结果:1)在相同刺激时间下,随着rsTRAIL浓度增加,穿越Transwell小室的HTR-8/... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１滋养细胞的分化路径［２］??

前言??滋养层细胞不断分化以形成高度侵袭力的ＥＶＴ，而这种“侵袭力”受到的“生理限制”?［３－４］，包括：①“时间”限制：滋养细胞的侵袭最早从受精始，至孕１２周时达到顶峰，之后逐渐减弱直至妊娠２０周基本停止；②“”限制：滋养细胞侵袭仅局限在子宫肌层的１／３处。滋养细胞通过“有节、有调控性地生理侵袭”达蜕膜浅肌层约１／３处，促使螺旋动脉重铸、母胎阻力显著下降，建立起有效的母胎循环系统，以满足胎儿营养需求的生理供??。在这其中任何因素导致滋养细胞侵袭力的严密调控环境失衡，均会导致滋??细胞生物行为学改变，滋养细胞植入深度不足，引起子宫螺旋动脉重铸障碍，发后续相关病理病生事件，最终导致胎盘源性疾病（如子痫前期、ＦＧＲ、流）发生因此，对这一妇产科学的热点和难点问题一一?“滋养细胞侵袭的调控机制”的深入研究可以揭示该类疾病的发生发展过程，同时为诊断和??疗该类疾病提供理论及实验支持。??

?７２ｈ??Ｔｉｍｅ?（ｈ）??图１－３不同浓度ｒｓＴＲＡＩＬ刺激ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ细胞后的细胞增殖曲线??予?０?ｎｇ／ｍｌ、０＿１?ｎｇ／ｍｌ、１?ｎｇ／ｍｌ、１０?ｎｇ／ｍｌ?的?ｒｓＴＲＡＩＬ?刺激?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?细胞分别在?２４?ｈ、??４８?ｈ、７２?ｈ行ＣＣＫ８比色法，根据反应后在４５０ｎｍ水平的吸光度绘制细胞增殖曲线。??Ｆｉｇ?１－３?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅｌｌｓ??ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｓＴＲＡＩＬ??Ｕｓｉｎｇ?ＣＣＫ８?ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ?ｍｅｔｈｏｄ?ｔｏ?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ?ｔｅｓｔ?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ??ｒｓＴＲＡＩＬ?ａｔ?ｔｈｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?０?ｎｇ?／?ｍｌ，?０．１?ｎｇ?／?ｍｌ，?１?ｎｇ?／?ｍｌ，?１０?ｎｇ?／?ｍｌ?ｆｏｒ?２４ｈ＞?４８ｈ＞?７２ｈ．??Ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅ?ｗａｓ?ｄｒａｗｅｄ?ａｃｃｏｒｄｉｎｇ?ｔｏ?ｔｈｅ?ＯＤ?ｖａｌｕｅ?ａｔ?４５０ｎｍ?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ．??３．３?ｒｓＴＲＡＩＬ对ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ细胞凋亡的影响：??予?Ｏｎｇ／ｍｌ、０．１?ｎｇ／ｍｌ、１?ｎｇ／ｍｌ、１０?ｎｇ／ｍｌ?的?ｒｓＴＲＡＩＬ?刺激?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?细??胞４８?ｈ后通过Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＥＧＦＰ／ＰＩ双染法后予流式细胞仪检测细胞凋亡情况，??结果显示（图１－４、１－５

【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA、缺氧与子痫前期关系的研究[J]. 雷帝,范翠芳.  医学综述. 2017(12)
[2]MicroRNA-155通过调节CXCR4/PI3K/AKT途径影响滋养细胞的侵袭与迁移[J]. 张展,李爱萍,王媛媛,宋婉玉,徐娜,刘慧,周洁.  中国免疫学杂志. 2017(01)
[3]子痫前期患者血浆中sTRAIL、胎盘组织TRAIL及TRAIL受体的变化及意义[J]. 牟纯玮,芮塬,谢晓珍,周尚谦,李雪媛,王志坚.  现代妇产科进展. 2016(12)
[4]TRAIL通过降低EGFR的表达水平抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭[J]. 李秀萍,徐志伟,刘葆金,吴崇学,朱坤潮,谢亮,朱小峰,苏微微,李海甲,孟旭莉.  中国肿瘤生物治疗杂志. 2015(06)
[5]MiR-146a在恶性实体肿瘤中的研究新进展[J]. 张秀玲,何融泉,李萍,陈罡.  实用医技杂志. 2014(12)
[6]滋养细胞侵袭力分子调节机制的研究进展[J]. 白冰,李娟,罗欣,漆洪波.  重庆医科大学学报. 2013(10)
[7]MiR-146a调节TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移及其分子机制[J]. 刘丹,姜明红,刘敏,高静,刘彦信,郑德先.  基础医学与临床. 2013(07)

博士论文
[1]TRAIL耐药细胞生物学行为改变及其分子机制的研究[D]. 王海冀.山东大学 2014
[2]Rho亚家族蛋白在EGF介导的人滋养细胞迁移中的作用及机制研究[D]. 韩健.第三军医大学 2010



本文编号：2930195