壳聚糖的改性及其抗凝血活性研究

发布时间：2017-04-05 02:16

  本文关键词：壳聚糖的改性及其抗凝血活性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：壳聚糖是自然界中唯一的碱性多糖,资源丰富,价格低廉,生物活性优越,并广泛应用于医药、食品、农业和化工等方面。当前,肝素是临床应用中最常用的抗凝血药物之一,虽然其具有很高的抗凝血活性,但会引起内出血症状等副作用。因此,本论文通过对壳聚糖进行改性,以望获得与肝素构效关系相似的类肝素物质,为医学临床研究提供一定的科学依据。主要研究结果如下： 1.不同分子量壳聚糖的理化性质测定 采用H202氧化法制备低分子壳聚糖,测定其理化性质,结果显示：低分子壳聚糖与壳聚糖的具有相同的脱乙酰度,均为85.2%；而粘均分子量由6.3×105下降到1.3×104；颜色也由白色变为黄色。 2.低分子磺化壳聚糖的研制 考察反应温度、氯磺酸用量和反应时间对低分子磺化壳聚糖含硫量的影响,正交优化结果显示,反应温度对磺化产物含硫量影响最大,其次是氯磺酸用量,反应时间影响最小；最佳反应条件：反应温度70℃,氯磺酸用量3mL和反应时间4h,最大含硫量8.94%。 3.低分子磺化壳聚糖体外抗凝血活性研究 用医学上经典的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)来考察低分子磺化壳聚糖的抗凝血活性,以生理盐水和肝素钠作对照；低分子磺化壳聚糖可延长APTT,对PT和TT影响不明显,表明其是通过内源性系统来影响凝血过程的；在浓度100μg/mL-200μg/mL内,低分子磺化壳聚糖溶液和APTT存在一定的剂量依赖关系；在含硫量(S%)4.61%-8.94%范围内,低分子磺化壳聚糖抗凝血活性与含硫量成正相关。 4.低分子磺化壳聚糖抑菌活性研究 采用滤纸片抑菌圈法测定磺化壳聚糖的抑菌活性。以无菌生理盐水为对照,壳聚糖及其衍生物均具有一定的抑菌效果,其中低分子磺化壳聚糖的抑菌效果最好。分别研究不同含硫量的低分子磺化壳聚糖的抑菌活性,随着样品浓度的增加,其抑菌效果就越好；样品2#(S%=7.96%)对抑制枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌效果最好,而样品1#(S%=8.94%)对大肠杆菌抑制作用最佳。 5.磺化羧化壳聚糖的制备及其抗凝血活性研究 首先,制备O-羧甲基壳聚糖,考察碱化时间、反应温度、氯乙酸用量和反应时间对羧化产物取代度(DS)的影响。以羧化壳聚糖为原料,研究磺化羧化壳聚糖的制备；磺化羧化壳聚糖体外抗凝血实验结果表明：磺化羧化壳聚糖的抗凝血活性受到其含硫量和羧甲基取代度两者的影响；其中样品(DS=0.668,S%=8.316%)表现出最好的抗凝血活性。磺化羧化壳聚糖可显著延长APTT,对PT和TT影响不明显,表明其是由内源性系统来影响凝血过程的。
【关键词】：壳聚糖 磺化 羧化 抗凝血 抑菌
【学位授予单位】：安徽工程大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R3416;Q53
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-14
• 第1章 绪论14-24
• 1.1 壳聚糖简介14-15
• 1.2 壳聚糖的化学修饰及其应用15-18
• 1.2.1 酰基化反应15-16
• 1.2.2 烷基化反应16-17
• 1.2.3 羧基化反应17
• 1.2.4 季铵化反应17
• 1.2.5 交联反应17-18
• 1.3 磺化壳聚糖的研究18-19
• 1.3.1 磺化壳聚糖的简介18
• 1.3.2 磺化壳聚糖的制备18-19
• 1.3.3 磺化体系的选择19
• 1.4 磺化壳聚糖的应用19-22
• 1.4.1 抗凝血活性20
• 1.4.2 抗肿瘤和免疫功能20-21
• 1.4.3 抑菌活性21
• 1.4.4 抗氧化功能21-22
• 1.4.5 其他活性功能22
• 1.5 本文研究的意义22
• 1.6 研究内容22-24
• 第2章 低分子磺化壳聚糖的研制24-36
• 2.1 前言24
• 2.2 材料与仪器24-25
• 2.2.1 材料24-25
• 2.2.2 仪器25
• 2.3 实验方法25-28
• 2.3.1 低分子壳聚糖的合成25
• 2.3.2 壳聚糖的理化性质测定25-27
• 2.3.3 低分子磺化壳聚糖的合成27
• 2.3.4 低分子磺化壳聚糖单因素试验27
• 2.3.5 低分子磺化壳聚糖正交试验27-28
• 2.3.6 壳聚糖及其衍生物的红外表征28
• 2.3.7 低分子磺化壳聚糖含硫量的测定28
• 2.4 结果与讨论28-35
• 2.4.1 不同壳聚糖理化性质的测定28-29
• 2.4.2 低分子磺化壳聚糖含硫量标准曲线测定29
• 2.4.3 反应温度对低分子磺化壳聚糖含硫量的影响29-30
• 2.4.4 氯磺酸用量对低分子磺化壳聚糖含硫量的影响30-31
• 2.4.5 反应时间对低分子磺化壳聚糖含硫量的影响31
• 2.4.6 低分子磺化壳聚糖正交试验31-32
• 2.4.7 壳聚糖及其衍生物红外表征32-35
• 2.5 结论35-36
• 第3章 低分子磺化壳聚糖抗凝血活性研究36-42
• 3.1 前言36
• 3.2 材料与仪器36-37
• 3.2.1 材料36
• 3.2.2 仪器36-37
• 3.3 实验方法37
• 3.3.1 活化部分凝血活酶(APTT)时间的测定37
• 3.3.2 凝血酶原时间(PT)的测定37
• 3.3.3 凝血酶时间(TT)的测定37
• 3.3.4 统计分析37
• 3.4 结果与讨论37-41
• 3.4.1 抗凝血指标的测定37-38
• 3.4.2 低分子磺化壳聚糖溶液对APTT的影响38-39
• 3.4.3 低分子磺化壳聚糖溶液对PT的影响39-40
• 3.4.4 低分子磺化壳聚糖溶液对TT的影响40-41
• 3.5 结论41-42
• 第4章 低分子磺化壳聚糖抑菌活性研究42-47
• 4.1 前言42
• 4.2 材料与仪器42-43
• 4.2.1 材料42
• 4.2.2 仪器42-43
• 4.3 实验方法43
• 4.3.1 培养基43
• 4.3.2 菌种的培养和菌悬液的配制43
• 4.3.3 壳聚糖及其衍生物抑菌活性的测定43
• 4.3.4 低分子磺化壳聚糖抑菌活性的测定43
• 4.4 结果与讨论43-46
• 4.4.1 壳聚糖及其衍生物抑菌能力的测定43-44
• 4.4.2 磺化产物抑菌能力的测定44-46
• 4.5 结论46-47
• 第5章 磺化羧化壳聚糖的制备及其抗凝血活性研究47-61
• 5.1 前言47-48
• 5.2 材料与仪器48-49
• 5.2.1 材料48
• 5.2.2 仪器48-49
• 5.3 实验方法49-50
• 5.3.1 O-羧甲基壳聚糖的合成49
• 5.3.2 O-羧甲基壳聚糖单因素实验49
• 5.3.3 O-羧甲基壳聚糖取代度的测定49-50
• 5.3.4 磺化羧化壳聚糖的制备50
• 5.3.5 磺化羧化壳聚糖的理化性质测定50
• 5.3.6 磺化羧化壳聚糖的表征50
• 5.3.7 磺化羧化壳聚糖抗凝血活性研究50
• 5.4 实验结果50-59
• 5.4.1 反应条件对O-羧甲基壳聚糖取代度的影响51-53
• 5.4.2 羧甲基壳聚糖及磺化羧化壳聚糖红外表征53-54
• 5.4.3 O-羧甲基壳聚糖抗凝血活性研究54-55
• 5.4.4 磺化羧化壳聚糖溶液对活化部分凝血活酶时间的初筛55-56
• 5.4.5 磺化羧化壳聚糖溶液对活化部分凝血活酶时间的影响56-57
• 5.4.6 磺化羧化壳聚糖溶液对凝血酶原时间的影响57-58
• 5.4.7 磺化羧化壳聚糖溶液对凝血酶时间的影响58-59
• 5.5 结论59-61
• 第6章 结论与展望61-63
• 6.1 结论61-62
• 6.2 展望62-63
• 参考文献63-71
• 攻读学位期间发表论文71-72
• 致谢72

【参考文献】

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本文编号：286318