NF-κB介导的炎症相关疾病的分子调控机制研究

发布时间：2020-12-04 03:25

　　近年来,动脉粥样硬化（AS）患病人群日益增大,其机制研究因而成为重要的科学问题。AS是一种慢性炎症疾病,其中血管内皮细胞的功能失调是AS发生和发展的重要因素。已有的研究结果表明氧化低密度脂蛋白（oxLDL）作为AS的重要危险因子会引起血管内皮细胞的功能失调,集中表现在：1)内皮细胞的粘附分子（CAM）表达增加,从而使得内皮细胞更易粘附血液中白细胞,粘附在内皮细胞上的白细胞进而可以透过内皮进入血管平滑肌层发展成泡沫细胞以及释放炎症因子进一步加剧炎症反应；2)内皮一氧化氮合酶（eNOS）表达下降,一氧化氮（NO）释放减少,血管的舒张功能下降。这两个内皮损伤相关的特征事件,其分子调控机制尚不完全清楚。心肌素相关转录因子（MRTF-A）作为转录调控因子,参与血管平滑肌特异基因的转录调控从而影响平滑肌的舒缩功能。迄今为止,尚未有研究阐明MRTF-A在血管内皮细胞中的调控作用。我们发现,在ox-LDL刺激内皮细胞后,伴随着ICAM-1的表达上调和eNOS的下调,MRTF-A的表达也有增加而且其入核也有所增多。MRTF-A过表达能够同时增强oxLDL诱导的ICAM-1转录激活与eNOS转录抑制。干扰... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：140 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图示:ox-LDL诱导的内皮细胞粘附单核细胞的模式图(Expertrev.endocrinolmetab.2008)INrtncOkii:}? I ?VCAM-1 ll—]MacrophageLDLuptake

IP: IVIRTF-A IgG图3: ox-LDL增加MRTF-A在ICAM-1启动子上的募集(A)]洞长度片度的ICAM-l启动子转染HEK293(左)和HUVEC(右)，有无MRTF-A过农达情况卜，报?越因检测值的变化。(B) OX-LDL梯度处理HAEC后anti-MRTF-A抗体和对照IgG沉淀的ICAM-l启动子及内含子序列的DNA相对；a。(C) HUVEC中转染对照SiRNA和V1RTF-A siRNA以及有无组成型激活WioA存在的条件下ICAM-1启动子活性变化。(D)后负显性 RhoA 对 OX-LDL (100|ig/ml)处理 HAEC 后 MRTF-A 在 ICAM-l 启动子序列上募集的影响。（以上*表示：p<0.05)30

-430 -16?图6: MRTF-A介导ox-LDL抑制的eNOS.转录调控(A) HUVEC巾20|ag/ml ox-LDL及过表达MRTF-A对eNOS启动子报告基因值的影响。(B) 腺病毒载体的MRTF-A质粒在HAEC巾过表达后在有无ox-LDL (20ng/ml)的情况卜对eNOS的mRNA (上图）及蛋白（下图）水平的影响。(C) MRTF-A 沉默后，HUVEC (左）和 HAEC C/i)在 ox-LDL 处理后 eNOS 的 mRNA(上图）及蛋白（卜图）水平的改变。(D) HAEC中沉默MRTF-A农达后及ox-LDL (20|ag/ml)引起的eNOS酶活性的变化。(E) HEK293中MRTF-A过衣达（左）或持续激活性MRTF-A (D对eNOS不同启动子的转录激活。(F) ox-LDL梯度处理HAEC后MRTF-A在eNOS启动子-430/-168 域的募集变化。39


本文编号：2896942