乙型肝炎病毒对血浆载脂蛋白表达影响的研究及其机制探讨

发布时间：2020-12-27 04:30

　　人乙肝病毒（Hepatitis B virus, HBV）引起人肝脏急慢性炎症,最终导致肝纤维化（liver cirrhosis, LC）及肝癌（hepatocellular carcinoma, HCC）。目前对于HBV的致病和致癌机理还不是很清楚。为深入探讨HBV的致病机理,采用基因芯片系统筛选了肝癌细胞系HepG2和整合了HBV全基因组的HepG2.2.15细胞系中差异表达基因,检测结果发现载脂蛋白A1（ApoAl）和载脂蛋白B （ApoB）在HepG2.2.15中的表达明显低于HepG2细胞,而载脂蛋白M （ApoM）在HepG2.2.15细胞表达升高,进一步检测了HBV患者和健康对照者ApoA1、ApoB、ApoE和ApoM的血清学水平。结果表明,HBV感染过程中ApoA1和ApoB的血清学水平水平显著降低；而ApoM的血清学水平在HBV患者中显著升高。为探讨HBV调节ApoA1的机制,构建了ApoA1基因启动子荧光素酶的报告基因pApoA1-Luc,并采用RT-PCR和Western-blot检测了HBV对ApoA1mRNA和蛋白表达的影响,结果显示HBV能够在启动子、mR... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

HBV的基因组结构和转录产物

同时扩增cccDNA (图2)。产生的子代双链DNAI'〃4。基因组RM的合成结合宿主细胞受体后，通过膜融合过程，其核衣壳进入转运至细胞核内形成松他的环状DNA (relaxed circularcDNA中连接在正链5 ‘端的RNA残基和连接在负链5 ‘过DNA聚合酶催化正链被延长，且补齐DNA链中的缺)形成cccDNA。cccDNA是HBV前基因组合成前基因组板。前基因组RNA是病毒DNA基因组进行反转录的模板在核壳体内进行病毒DNA的复制[,5.链DNA的合成核壳体内，DNA聚合酶能结合前基因组RNA的5 ‘端中基因组RNA上的S莲环结构序列为模板，先合成4个碱基核苷酸转移至3 ‘端，互补结合在DR2区序列，并以前基后合成负链DNA。0000 cccDNA

脂蛋白A1启动子的克隆研究中，用特异性引物，以人基因组DNA为模板进行PCR，扩片段即ApoAl基因启动子pApoAl-Luc，将该启动子克隆到pGL3载体中。载体图谱如图1-1所示。


本文编号：2941106