山羊精子介导基因转移的实验研究

发布时间：2021-01-05 10:36

　　精子介导基因转移（Sperm-mediated gene transfer, SMGT）是以精子为载体，在受精时将外源目的基因导入卵母细胞，是目前转基因动物研究中简单而高效的方法学之一。SMGT的核心是高效、稳定的体外受精技术和精子转染技术，前者不仅有利于获得大量的胚胎来源，而且还对胚胎质量以及胚胎移植后的胎儿发育和动物个体获得有重要影响，后者是提高转基因动物成功率的关键和保证。由于国内外目前在山羊体外受精和精子转染方面的研究尚不成熟，影响了我们即将开展的以精子介导方法为基础的转基因山羊乳腺生物反应器课题进程。为此，本实验对山羊体外受精技术和精子转染技术展开研究，以建立SMGT技术平台，为转基因山羊乳腺生物反应器的研制奠定基础。本研究共分为5部分，第一、二、三部分分别就体外受精技术中的3个关键环节：卵母细胞成熟、精子获能和受精、早期胚胎体外培养进行研究，探讨体外受精影响因素，优化培养系统，建立稳定的体外胚胎生产体系。第四部分对精子供体选择、外源DNA转染精子的影响因素、精子内化转运机制以及转染方法的优化组合进行探讨，建立山羊精子高效转染方法。第五部分利用已建立的体外受精技术和精子转染技... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：111 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英文缩写一览表
英文摘要
中文摘要
论文正文
    前言
    第一章 山羊卵巢卵母细胞体外成熟的研究
        摘要
        引言
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
        参考文献
    第二章 山羊精子体外获能的研究
        摘要
        引言
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
        参考文献
    第三章 山羊早期胚胎体外培养的研究
        摘要
        引言
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
        参考文献
    第四章 外源DNA转染山羊精子的研究
        摘要
        引言
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
        参考文献
    第五章 精子介导法生产转基因山羊早期胚胎的实验研究
        摘要
        引言
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
        参考文献
    全文总结
    致谢
文献综述
博士在读期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]考马斯亮蓝染色评价哺乳动物精子顶体反应发生的效果[J]. 叶华虎,苟本富,刘卢生,倪勇,伍明山,魏泓.  第三军医大学学报. 2003(07)
[2]猪卵母细胞在不同培养液中成熟后的发育潜力[J]. 叶华虎,魏泓,陈俊颖.  第三军医大学学报. 2003(06)
[3]“两步法”体外培养山羊卵母细胞的初步研究[J]. 邵华,孟和宝力高,张锁链,旭日干.  内蒙古大学学报(自然科学版). 2002(05)
[4]血清和促性腺激素对山羊卵母细胞核体外成熟的影响[J]. 马所峰,苗义良,兰国成,王子玉,常仲乐,谭景和.  中国兽医学报. 2002(04)
[5]动物胚胎体外培养研究进展[J]. 张靖飞,李裕强,刘月凤.  动物科学与动物医学. 2002(02)
[6]精子载体介导法生产转基因绵羊的研究[J]. 武坚,刘明军,李文蓉,黄俊成,史洪才,郭志勤.  草食家畜. 2001(S2)
[7]双色荧光原位杂交技术在异性间造血干细胞移植中的应用[J]. 李建勇,过宇,薛永权,吴德沛,夏学鸣,阮长耿.  中华血液学杂志. 2000(08)
[8]脂质体介导外源基因体外转染精子的研究[J]. 黄伟民,赖良学,乔桂林,岳军明,安靓,王凯,付殿国,殷震,李进.  第一军医大学学报. 2000(03)
[9]猪不同直径卵泡中卵母细胞体外培养的成熟潜力[J]. 韩毅冰,施维民,秦鹏春.  中国兽医学报. 2000(02)
[10]电穿孔导入法在家兔精子基因转移中的应用[J]. 黄伟民,乔贵林,赵君,赖良学,岳军明,安靓,王凯,付殿国,殷震,李进.  中国兽医学报. 2000(02)



本文编号：2958509